[发明专利]一种下调微小RNA-126表达的方法无效
| 申请号： | 201310543832.3 | 申请日： | 2013-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN104031980A | 公开（公告）日： | 2014-09-10 |
| 发明（设计）人： | 徐林;胡燕;周涯;李永菊;廖珍媛 | 申请（专利权）人： | 遵义医学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人： | 刘楠 |
| 地址： | 563000 *** | 国省代码： | 贵州;52 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 下调 微小 rna 126 表达 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种下调微小RNA-126表达的方法，其特征在于：在含CMV启动子的真核载体上构建靶向miR-126的真核表达载体pEGFP-C2-miR-126-sponge，以下调miR-126在真核细胞中的表达；且将该载体体外转染真核细胞后，利用荧光定量PCR仪检测miR-126成熟体的表达，通过体外实验观察下调miR-126表达后的生物学效应。
2.根据权利要求1所述的下调微小RNA-126表达的方法，其特征在于：所述的pEGFP-C2-miR-126-sponge的构建，具体是，利用软件完成miR-126-sponge的序列设计；再用HindⅢ/KpnI 双酶切骨架载体pEGFP-C2、目的片段miR-126-sponge，回收片段纯化，在16℃条件下过夜连接；连接后转化，挑取6个菌落，接种到含10μg/ml卡那霉素的LB培养基中，12小时后提取菌液和质粒小抽法抽提质粒，并通过引物实现目的片段的PCR扩增，扩增目的片的引物序列为：上游，5’-ACGTAAACGGCCACAAGTTC-3’；下游，5’-GATCTTGAAGTTCACCTTGATGC-3’； 重组质粒经HindⅢ和KpnI双酶切后，成功构建重组质粒pEGFP-C2-miR-126-sponge。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于遵义医学院，未经遵义医学院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310543832.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
