[发明专利]一种沙枣组织培养方法有效

专利信息
申请号: 201310547387.8 申请日: 2013-11-07
公开(公告)号: CN103583361A 公开(公告)日: 2014-02-19
发明(设计)人: 刘力强;宋福强 申请(专利权)人: 黑龙江锦绣大地生物工程有限公司
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 哈尔滨市文洋专利代理事务所(普通合伙) 23210 代理人: 何强
地址: 152000 黑龙江*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要:
搜索关键词: 一种 沙枣 组织培养 方法
【权利要求书】:

1.一种沙枣组织培养方法,其特征在于沙枣组织培养按以下步骤进行:

一、采集沙枣当年生枝条,反复冲洗后进行水培,嫩芽长到2~3cm长用剪刀剪下放在烧杯中,烧杯口用纱布盖住,清水滴浇2h±0.1h,然后取出嫩芽浸入浓度为75%的酒精中45s,再用无菌水冲洗3次,之后放入浓度为6%的NaClO溶液中处理6min,再用无菌水清洗3~5次,吸干水分后无菌操作将嫩芽上的叶片剪除,并将嫩芽的茎剪切成长度为1±0.2cm、带有节间的茎段,再将茎段接种于不含任何植物激素的MS培养基中,在25℃、每日光照16h、光照强度为2000lux的环境中初始培养10天;

二、选初始培养长出的无菌苗叶的叶柄部分切成0.5cm×0.5cm大小,然后转移至每升含有0.5mg6-苄氨基嘌呤和1.5mg萘乙酸的MS培养基中25℃培养60天;然后将愈伤块在无菌条件下切割成0.2cm×0.2cm×0.2cm大小转移至每升含1.0mg萘乙酸和0.5mg6-苄氨基嘌呤的MS培养基中25℃培养30天,长出幼芽;

三、将步骤二长出的幼芽移植于每升含有1.0mg萘乙酸和10mg多效唑的1/2MS培养基中培养20天,得到沙枣试管苗,然后经过炼苗,即完成沙枣的组织培养;

其中步骤一MS培养基中蔗糖浓度为30g/L、琼脂浓度为5.5g/L,MS培养基的pH值为5.8。

2.根据权利要求1所述的一种沙枣组织培养方法,其特征在于步骤一反复冲洗后将枝条剪成30±0.5cm长,枝条放入透明玻璃瓶中基部浸入清水中2~4cm进行水培,每天更换1次清水,并且每天用无菌纯净水喷洒枝条表面3~20次。

3.根据权利要求2所述的一种沙枣组织培养方法,其特征在于步骤一水培在朝阳的室内进行,室温保持在24±0.5℃。

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