[发明专利]一种含有灵芝多糖制剂的检测方法

权利要求书

1.一种含有灵芝多糖制剂的检测方法，其特征在于，灵芝多糖的检测方法包括如下步骤：

    （1）称取样品2.5±0.5g，置于锥形瓶中，加水100ml，加热回流提取35分钟，静置冷却，离心，精密吸取10ml滤液置于离心管中，缓慢加入4倍体积的无水乙醇，混匀，在5000r/min下离心25分钟，弃去上清液，残渣加水溶解，移至25ml量瓶中，加水定容至刻度，即得粗多糖溶液； 

    （2）精密吸取上述粗多糖溶液10ml，置于50ml离心管中，加入10%的氢氧化钠和铜试剂溶液混合溶液40ml，离心管置于90℃水浴40分钟，取出放置10～15分钟，在5000r/min转速下离心30分钟，弃去上清液，残渣用10%硫酸转移至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，即样品测试液；

所述的10%氢氧化钠和铜试剂溶液混合溶液是将10%的氢氧化钠20ml加入铜试剂溶液20ml中，混匀；

    （3）准确吸取样品测试液2.0ml，置于25ml比色管中，加入5%苯酚试液1ml，混匀，加入浓硫酸5ml，比色管置于90℃水浴中15分钟，取出，放置15分钟，分光光度计490nm处以空白试剂为参比，1cm比色皿测定其吸光度为A，以标准曲线计算灵芝多糖含量。

2.    如权利要求1所述的含有灵芝多糖制剂的检测方法，其特征在于，所述的铜试剂溶液的配制方法为：称取1.5g五水合硫酸铜，10g枸橼酸钠，加水溶解至330ml，混匀，制得铜试剂储备液；取铜试剂储备液100ml，加入固体无水硫酸钠12g使其溶解，混匀，即得铜试剂溶液。

3.    如权利要求1所述的含有灵芝多糖制剂的检测方法，其特征在于，所述的标准曲线绘制方法是：精确吸取0、0.2、0.4、0.8、1.0、1.5ml 葡聚糖标准品溶液，重量含量为0.25mg/ml，分别置于25ml比色管中，精确补充水至2.0ml， 5%苯酚溶液1ml，混匀，加入浓硫酸5ml，混匀，比色管置于90℃水浴中15分钟，取出于室温下冷却15分钟，用分光光度计于490nm处以空白试剂为参比，1cm比色皿测定吸光度值；以葡聚糖浓度单位C，mg/ml为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线C=KA+B。

4.如权利要求1所述的含有灵芝多糖制剂的检测方法，其特征在于，所述的空白试剂配制方法为：准确吸取2.0ml水，加入5%的苯酚溶液1ml，混匀，加入浓硫酸5ml，混匀，比色管置于90℃水浴中15分钟，取出于室温下冷却15分钟，即得。

5.如权利要求1、3、4任一项所述的含有灵芝多糖制剂的检测方法，其特征在于，所述的浓硫酸的重量含量为90-98%。