[发明专利]一种抗幽门螺杆菌免疫巴氏牛奶的生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物制品的技术领域，尤其涉及一种抗幽门螺杆菌免疫巴氏牛奶的生产方法。

背景技术

关于抗幽门螺杆菌免疫免疫牛奶，生物科技研究工作者对该项课题，作了种种探索研究与试验，获得成功的确不多，在总结前人的基楚之上，建立我们的抗幽门螺杆菌免疫菌株的培养及抗原受体体系。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗幽门螺杆菌免疫牛奶的生产方法。而获得具有人体抗幽门螺杆菌免疫的牛奶。具体方法步骤如下：

一、幽门螺杆菌的英文缩写（Hp）菌株建立，以下简称Hp

（一）取胃粘膜组织处理后采用微需氧培养法（85%N₂、10%CO₂、5%H₂），37℃培养2-3天，革兰氏染色及形态学鉴定及尿素酶、触酶试验等生物学性状鉴定的Hp；

（二）从北京生物所获取的NCTC11637和国际标准菌株SS1。

二、免疫原的制备

（一）用自分离Hp菌株和标准Hp菌株经培养后收集菌体，用生理盐水制成悬液；

（二）佛氏佐剂制备：羊毛脂1.5g、液体石蜡8.5ml、结核菌素26mg，充分研磨均匀，高压灭菌后备用；

（三）Hp混合菌液3ml(9×10⁹cfu/ml),加3ml佛氏完全佐剂，再充分研磨均匀呈乳状，超声粉碎菌体，制成多价混合疫苗。

三、免疫奶牛

（一）免疫程序: Hp混合疫苗作为抗原,免疫注射健康奶牛：

1、皮下5-6个点注射，每点1.0ml；

2、前后腿内侧腋窝部和腹股沟4个点注射，每点1.5ml;

3、免疫注射相隔时间为12-15天。

（二）免疫试血试奶： 

经过若干次免疫后抽取牛血分离血清及牛奶用酶联免疫实验检测抗Hp IgG效价，牛血中抗体效价≥512，牛奶中抗体效价≥256即可收获牛奶，否则，应加强注射一次后再收获牛奶。

四、收获乳汁后的处理技术

（一）温度控制：

1、采用巴氏灭菌法温度控制或高温瞬间灭菌温度与时间的控制；

2、采用真空冷冻干燥技术对高活性抗幽门螺杆菌免疫乳进行冷冻干燥物理性状的质量控制。

（二）物理化学指标控制

（三）卫生细菌学指标控制

五、编制抗-Hp IgG免疫乳的企业标准，以规范该产品的生产工艺及质量控制。

具体实施方式

本发明所述的一种抗幽门螺杆菌免疫巴氏牛奶的生产方法。实施方式重述如下：

1、幽门螺杆菌的英文缩写（Hp）菌株建立，以下简称Hp

（1）取胃粘膜组织处理后采用微需氧培养法（85%N₂、10%CO₂、5%H₂），37℃培养2-3天，革兰氏染色及形态学鉴定及尿素酶、触酶试验等生物学性状鉴定的Hp；

（2）从北京生物所获取的NCTC11637和国际标准菌株SS1。

2、免疫原的制备

（1）用自分离Hp菌株和标准Hp菌株经培养后收集菌体，用生理盐水制成悬液；

（2）佛氏佐剂制备：羊毛脂1.5g、液体石蜡8.5ml、结核菌素26mg，充分研磨均匀，高压灭菌后备用；

（3）Hp混合菌液3ml(9×10⁹cfu/ml),加3ml佛氏完全佐剂，再充分研磨均匀呈乳状，超声粉碎菌体，制成多价混合疫苗。

3、免疫奶牛

（1）免疫程序: Hp混合疫苗作为抗原,免疫注射健康奶牛：

皮下5-6个点注射，每点1.0ml；

前后腿内侧腋窝部和腹股沟4个点注射，每点1.5ml;

免疫注射相隔时间为12-15天。

（2）免疫试血试奶： 

经过若干次免疫后抽取牛血分离血清及牛奶用酶联免疫实验检测抗Hp IgG效价，牛血中抗体效价≥512，牛奶中抗体效价≥256即可收获牛奶，否则，应加强注射一次后再收获牛奶。

4、收获乳汁后的处理技术

（1）温度控制：

采用巴氏灭菌法温度控制或高温瞬间灭菌温度与时间的控制；

采用真空冷冻干燥技术对高活性抗幽门螺杆菌免疫乳进行冷冻干燥物理性状的质量控制。

（2）物理化学指标控制

（3）卫生细菌学指标控制

5、编制抗-Hp IgG免疫乳的企业标准，以规范该产品的生产工艺及质量控制。