[发明专利]拟穴青蟹抗真菌型抗脂多糖因子及其制备方法和应用无效
| 申请号： | 201310552464.9 | 申请日： | 2013-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN103601795A | 公开（公告）日： | 2014-02-26 |
| 发明（设计）人： | 李新苍;房文红;周俊芳;仉晓文;朱磊 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
| 主分类号： | C07K14/435 | 分类号： | C07K14/435;C12N15/12;C12N15/70;A61K38/17;A61P31/10;A23K1/17 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 赵青 |
| 地址： | 200090 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 拟穴青蟹抗 真菌 型抗脂 多糖 因子 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种拟穴青蟹抗真菌型抗脂多糖因子SpALF4成熟肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。
2.一种编码基因，其编码权利要求1所述的成熟肽。
3.一种拟穴青蟹抗真菌型抗脂多糖因子SpALF4全长氨基酸，其序列如SEQ ID NO:2所示。
4.一种拟穴青蟹抗真菌型抗脂多糖因子SpALF4的全长cDNA，其碱基序列如SEQ ID NO:1所示。
5.拟穴青蟹抗真菌型抗脂多糖因子SpALF4的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(a)根据成熟肽序列SEQ ID NO:6，设计引物扩增成熟肽序列片段；
(b)构建拟穴青蟹抗脂多糖因子SpALF4的重组表达载体；
(c)将步骤(b)所获得重组表达载体导入宿主细胞，并诱导宿主细胞表达，获得含SpALF4的表达产物；及
(d)将步骤(c)所获得表达产物经分离纯化后，获取重组蛋白，即SpALF4。
6.如权利要求5所述的制备方法，其中，在步骤(b)中，所述表达载体选用pGEX-4T-1；步骤(c)中，所述宿主菌为大肠杆菌Rosetta(DE3)。
7.如权利要求5或6所述的制备方法，其中，获得所述成熟肽序列包括如下步骤：对拟穴青蟹血细胞和肝胰腺组织混样进行转录组测序，并对测定序列进行数据分析，通过与已有ALF家族比对，得到拟穴青蟹的抗真菌型抗脂多糖因子的cDNA序列SEQ ID NO:1，确定其开放阅读框SEQ ID NO:5，编码SpALF4蛋白序列SEQ ID NO:2，并推测其中的成熟肽序列SEQ ID NO:6。
8.拟穴青蟹抗真菌型抗脂多糖因子SpALF4在制备抗真菌药物中的应用。
9.如权利要求8所示应用，其中所述真菌为白色念珠球菌。
10.拟穴青蟹抗真菌型抗脂多糖因子SpALF4在制备动物抗病原微生物饲料添加剂中的应用。
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