[发明专利]一种抑制麦蚜细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因表达的dsRNA及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种抑制麦蚜细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因表达的dsRNA及其应用。

背景技术

麦蚜（尤其是麦长管蚜）是危害中国小麦生产的主要害虫之一，据统计，中国每年小麦蚜虫危害面积可高达0.17亿公顷，占小麦总种植面积的62%，造成减产15%-30%，严重时可高达50%。近年来，由于全球气候变暖、耕作制度变化等因素，使蚜虫的繁殖能力和适应性显著增强，其危害日趋严重。目前，蚜虫防治以喷洒农药为主，大量使用农药不仅对人畜有害，而且造成了严重的环境污染。培育抗蚜虫小麦品种是防止蚜虫危害的最有效途径，但由于现有种质资源中缺乏有效的抗蚜基因，抗性机制尚不明确，常规育种难以奏效。挖掘和利用新型抗蚜基因并通过基因工程培育小麦抗蚜新种质具有重要意义。

植物介导的RNAi技术已成为农作物抗虫基因工程的热点之一，通过寄主植物表达相应昆虫特异基因的dsRNA，昆虫取食植物后沉默其相应的基因从而达到控制害虫危害的目的。RNAi的过程是双链RNA（dsRNA）进入生物体内，被Dicer酶切割成21-23nt的siRNA，siRNA与RNA诱导沉默复合物结合，与互补序列的靶mRNA结合，被Dicer识别，造成靶基因表达量的下降。近年来，利用dsRNA体外饲喂或注射来筛选RNA靶标基因，导致靶标基因表达和沉默，已经广泛应用于昆虫生长发育关键基因的鉴定和功能分析。

发明内容

本发明的目的是提供一种抑制麦蚜细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因表达的dsRNA及其应用。

本发明提供了一种双链RNA分子，如序列表的序列2所示。

本发明还保护编码所述RNA分子的DNA分子。所述DNA分子为序列表的序列1所示的DNA分子。

含有所述RNA分子的重组表达载体、转基因细胞系、重组菌或表达盒均属于本发明的保护范围。

含有所述DNA分子的重组表达载体、转基因细胞系、重组菌或表达盒均属于本发明的保护范围。

本发明还保护所述RNA分子或所述DNA分子在制备产品中的应用；所述产品的用途为如下（1）至（4）中的至少一种：（1）防治蚜虫；（2）促进蚜虫死亡；（3）抑制蚜虫生长；（4）抑制蚜虫体内细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因的表达。所述蚜虫具体可为麦蚜，更具体可为麦长管蚜。所述蚜虫可为具有细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因的蚜虫。所述细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因具体可为具有序列表的序列5所示DNA片段的DNA分子或具有与序列表的序列5所示的DNA片段具有80%以上同源性的DNA片段的DNA分子。

本发明还保护一种产品，其活性成分为所述RNA分子或所述DNA分子；所述产品的用途为如下（1）至（4）中的至少一种：（1）防治蚜虫；（2）促进蚜虫死亡；（3）抑制蚜虫生长；（4）抑制蚜虫体内细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因的表达。所述蚜虫具体可为麦蚜，更具体可为麦长管蚜。所述蚜虫可为具有细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因的蚜虫。所述细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因具体可为具有序列表的序列5所示DNA片段的DNA分子或具有与序列表的序列5所示的DNA片段具有80%以上同源性的DNA片段的DNA分子。

本发明还保护所述RNA分子或所述DNA分子的应用，为如下（1）至（4）中的至少一种：（1）防治蚜虫；（2）促进蚜虫死亡；（3）抑制蚜虫生长；（4）抑制蚜虫体内细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因的表达。所述蚜虫具体可为麦蚜，更具体可为麦长管蚜。所述蚜虫可为具有细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因的蚜虫。所述细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因具体可为具有序列表的序列5所示DNA片段的DNA分子或具有与序列表的序列5所示的DNA片段具有80%以上同源性的DNA片段的DNA分子。

本发明还保护用于抑制蚜虫体内细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因的表达的物质在制备产品中的应用；所述产品的用途为如下（a）和/或（b）和/或（c）：（a）防治蚜虫；（b）促进蚜虫死亡；（c）抑制蚜虫生长。所述蚜虫具体可为麦蚜，更具体可为麦长管蚜。所述蚜虫可为具有细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因的蚜虫。所述细胞色素C氧化酶VIIc亚基基因具体可为具有序列表的序列5所示DNA片段的DNA分子或具有与序列表的序列5所示的DNA片段具有80%以上同源性的DNA片段的DNA分子。