[发明专利]发酵液中黄腐酸含量的测定方法

说明书

技术领域：

本发明与黄腐酸含量的测定方法有关，特别与发酵液中黄腐酸含量的测定方法有关。

背景技术：

发酵液是将秸秆、蔗渣酒类发酵酒精等有机资材（植物残渣）经过深层液体生物发酵技术而产生的，除含有高浓度的腐熟型有机质、腐植酸、氨基酸、高吸收率N、P、K外，更含有在发酵过程中产生的未知生长因子(UGF)，对植物可起到类似添加复硝酚钠、萘乙酸等人工合成激素的刺激作用，可广泛作为叶面肥、液体冲施肥、固体有机颗粒肥的辅助原料或直接稀释作为成品叶面肥、冲施肥使用。其功效表现为：1、改善贫瘠土壤、提高化学肥料的利用率。2、含有丰富的氨基酸、钾及其它植物营养成分能快速被植物吸收利用。3、增加土壤有机质的含量，疏松土壤，改善土壤中微生物的生育环境。

以焦磷酸钠提取液提取发酵液，可将除腐植酸和糖以外的其它物质除去，其中的腐植酸分为黄腐酸、棕腐酸、黑腐酸。黄腐酸是腐植酸中的低分子酸，其特点是分子量较小，生物活性大，酸性基因多，渗透性强，易被植物吸收。而棕黑腐酸是高分子有机酸，较难被植物吸收利用，特别是作为叶面肥或液体肥，在Cu、Fe、Zn、Mn等二价离子的作用下，很易絮凝沉淀，因此，在生产过程中一般会出现絮凝，难以成为真溶液，即使使用螯合剂，在硬水中也易被沉淀。喷施在作物叶面也很难被作物吸收利用。可见目前在“含腐植酸水溶肥料”中，采取酸沉淀氧化还原滴定法排斥低分子黄腐酸类物质的检测方法，是不妥当的。若以总腐植酸和棕黑腐植酸之间的差值，或将酸沉淀棕黑腐植酸后滤液中的有机物作为黄腐酸含量也是不妥当的。因为这两种方法都是将原料中溶于提取液和酸的部分全部当成了黄腐酸。这部分不属于黄腐酸的物质则以糖为主。因此建立一种测定发酵液中真正的黄腐酸的检测方法是非常必要的。

发明内容：

本发明的目的是为了克服以上不足，提供一种能准确测定发酵液中的黄腐酸含量的测定方法。

本发明的目的是这样来实现的：

本发明发酵液中黄腐酸含量的测定方法包括以下步骤：

1）、发酵液中糖的测定：

将发酵液样品的水溶性糖经热稀酸彻底水解后转化成还原糖，再用费林试剂A、B与还原糖共沸、生成氧化亚铜沉淀，以次甲基蓝为指示剂，用发酵液样品滴定沸腾状态的溶液、达到终点时、稍微过量的还原糖将次甲基蓝还原成无色为终点，依据葡萄糖标准滴定液的消耗量求得还原糖的含量，发酵液样品中还原糖含量X以葡萄糖计按下式计算：

X=C1(V1-V2)×D1m1×100%]]>

式中：C₁——葡萄糖标准溶液浓度，g/ml；

V₁——空白滴定时耗用葡萄糖标准液体积，ml；

V₂——样品滴定时耗用葡萄糖标准液体积，ml；

D₁——样品稀释倍数；

m₁——样品称取量，g；

计算结果保持二位小数，

费林试剂A、B二液等体积混合时生成的天蓝色Cu(OH)₂沉淀后，立即与酒石酸钾钠起反应生成深蓝色的酒石酸钾钠铜络合物。此络合物与还原糖共热时，二价铜即被还原糖还原为一价的红色氧化亚铜沉淀，氧化亚铜沉淀与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物避免干扰滴定。达到终点时，稍微过量的葡萄糖标准滴定液将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈酒红色而指示滴定终点，根据葡萄糖标准滴定液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品所消耗葡萄糖标准滴定液的体积。

反应方程式如下：

滴定时是以亚甲基蓝为氧化还原指示剂，稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝，即达滴定终点。