[发明专利]一种在植株水平上删除转基因水稻标记基因的方法在审
申请号: | 201310560710.5 | 申请日: | 2013-11-13 |
公开(公告)号: | CN103589750A | 公开(公告)日: | 2014-02-19 |
发明(设计)人: | 王锋;陈松彪;陈在杰;程倩倩;陈子强;胡昌泉;林艳;田大刚;颜静宛 | 申请(专利权)人: | 福建省农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350003 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 植株 水平 删除 转基因 水稻 标记 基因 方法 | ||
1.一种在植株水平上删除转基因水稻标记基因的方法,其特征在于:包括以下步骤:
a.构建化学诱导型位点特异性重组系统的水稻转化载体,其中选择标记基因位于两个同向位点特异性识别序列之间,目的基因结构位于两个位点特异性识别序列之外;
b.利用该转化载体,通过农杆菌介导方法,转化水稻愈伤组织,筛选、分化产生转基因水稻植株;
c.种植转基因水稻植株,收获自交结实种子;
d.浸种、催芽过程中,经过化学诱导处理所收获种子,诱导位点特异性识别序列产生重组,介导选择标记基因发生删除;
e.种植并检测经处理萌发的幼苗,进一步分子检测转基因结构的重组行为,获得选择标记基因被删除的转基因水稻幼苗。
2.根据权利要求1所述的在植株水平上删除转基因水稻标记基因的方法,其特征在于:原载体中选择标记基因为潮霉素抗性基因hpt,原载体可以用于组装其它选择标记基因。
3.根据权利要求1所述的在植株水平上删除转基因水稻标记基因的方法,其特征在于:原载体中位点特异性识别序列是loxP-FRT融合序列,原载体可以用于组装其它高效位点特异性重组酶识别序列。
4.根据权利要求1所述的在植株水平上删除转基因水稻标记基因的方法,其特征在于:原载体中目标基因为报告基因GUS,原载体可以用于组装其它有应用价值的基因。
5.如权利要求4所述的有应用价值的基因,其特征在于:有应用价值的基因指抗虫基因、抗病基因、抗除草剂基因、抗逆基因、抗衰老基因、品质功能改良基因以及由上述基因组成的融合或多价基因。
6.如权利要求1所述的在植株水平上删除转基因水稻标记基因的方法,其特征在于:水稻是指籼稻和粳稻。
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