[发明专利]一种用于检测冯维勒布兰德因子的试剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于检测冯维勒布兰德因子的试剂，其特征在于：所述用于检测冯维勒布兰德因子的试剂为应用胶乳增强免疫比浊法的检测试剂，由试剂1和试剂2组成，其中试剂1为抗冯维勒布兰德因子的抗体胶乳试剂，抗冯维勒布兰德因子的抗体胶乳试剂为抗冯维勒布兰德因子与胶乳颗粒结合而成的抗冯维勒布兰德因子的抗体胶乳试剂；试剂2为应用液。

2.根据权利要求1所述的用于检测冯维勒布兰德因子的试剂，其特征在于：所述用于检测冯维勒布兰德因子的试剂还包括冯维勒布兰德因子标准品或标准曲线；所述冯维勒布兰德因子标准品为含有不同浓度的冯维勒布兰德因子的反应缓冲液；标准曲线为冯维勒布兰德因子在人体内含量的标准曲线。

3.根据权利要求1所述的用于检测冯维勒布兰德因子的试剂，其特征在于：所述抗冯维勒布兰德因子的抗体胶乳试剂是通过将抗冯维勒布兰德因子的抗体的氨基与胶乳颗粒的羧基经二步反应后形成共价键而得到；所述二步反应包括：第一步将胶乳颗粒先与结合剂反应，第二步再将胶乳颗粒与抗冯维勒布兰德因子抗体反应。

4.根据权利要求3所述的用于检测冯维勒布兰德因子的试剂，其特征在于：所述抗冯维勒布兰德因子的抗体胶乳试剂是通过将抗冯维勒布兰德因子的抗体的氨基与胶乳颗粒的羧基经二步反应后形成共价键而得到；首先由将胶乳颗粒的羧基与结合剂在弱酸性下反应成胶乳颗粒-结合剂中间体，再将胶乳颗粒-结合剂中间体在弱碱性下与抗冯维勒布兰德因子抗体氨基反应制得抗冯维勒布兰德因子抗体胶乳试剂。

5.根据权利要求1所述的用于检测冯维勒布兰德因子的试剂，其特征在于：所述胶乳颗粒为苯乙烯胶乳颗粒。

6.根据权利要求1所述的用于检测冯维勒布兰德因子的试剂，其特征在于：所述胶乳颗粒的粒径为200～1000nm。

7.根据权利要求8所述的用于检测冯维勒布兰德因子的试剂，其特征在于：所述结合剂选自浓度为0.1～5％的碳二亚胺。

8.一种制备权利要求1～7任一所述的用于检测冯维勒布兰德因子的试剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤a)制备抗冯维勒布兰德因子抗体胶乳：将抗冯维勒布兰德因子抗体与胶

乳颗粒经二步反应后交联成抗冯维勒布兰德因子抗体胶乳；

步骤b)制备应用液或稀释液。

9.根据权利要求8所述的制备用于检测冯维勒布兰德因子的试剂的方法，其特征在于，步骤a)的具体操作如下：将胶乳颗粒用纯净水清洗后悬浮于活化缓冲液中；加入结合剂在温度小于50℃下搅拌反应，从而活化胶乳颗粒；再加入抗冯维勒布兰德因子抗体在结合缓冲液中在温度小于50度下搅拌反应；再悬浮于含有封闭剂的灭活液中反应，经清洗后悬浮于保存缓冲液中，得抗冯维勒布兰德因子抗体胶乳悬液，置于4℃环境放置。

10.一种制备权利要求1～7任一所述的用于检测冯维勒布兰德因子的试剂的应用，其特征在于：将权利要求1～7任一所述的用于检测冯维勒布兰德因子的试剂作为检测试剂用于制备冯维勒布兰德因子检测产品。