[发明专利]用于检测油菜菌核病菌的方法和培养基有效
申请号: | 201310564218.5 | 申请日: | 2013-11-14 |
公开(公告)号: | CN103571910A | 公开(公告)日: | 2014-02-12 |
发明(设计)人: | 黄青春;丰俊;李刚月;钱旭红;陶黎明;徐文平 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;C09B61/00;C12R1/645 |
代理公司: | 上海顺华专利代理有限责任公司 31203 | 代理人: | 程意意 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 油菜 菌核 病菌 方法 培养基 | ||
1.一种检测样品中油菜菌核病菌的方法,包括:
(a)将样品接入含有特异性检测试剂的固体培养基或液体培养基中,置于适宜条件下培养,其中所述特异性检测试剂为3-(2-吡啶基)甲基-2-(4-氯苯基)亚氨基噻唑烷或其含亚氨基噻唑烷结构的衍生物;和
(b)目测观察培养所得菌落或镜检观察所得液体培养物中菌丝体的颜色,如观察到绿色菌落或菌丝体,则表明样品中含有油菜菌核病菌。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述特异性检测试剂的结构式如下:
其中,R1表示4-Cl、2-Cl、2-CH3、2-F、2,4-F或4-CF3,且R2表示4-CH3或4-Cl。
3.如权利要求1或2所述的方法,其中培养基中所述特异性检测试剂的含量为0.1~100.0μg/mL。
4.如权利要求1或2所述的方法,其中所述样品为疑有油菜菌核病菌的农林植物的子叶、茎秆、真叶或者土壤。
5.如权利要求1或2所述的方法,其中(a)中的培养为,样品接入含有0.1~100.0μg/mL3-(2-吡啶基)甲基-2-(4-氯苯基)亚氨基噻唑烷的培养基摇瓶或平板中,置于25℃条件下恒温培养1-3天。
6.如权利要求1或2所述的方法,其中还包括:
c1)当所述样品为田块土壤时根据固体培养基中出现的绿色菌落数来评估该田块中油菜菌核病菌的潜在危害程度,当所述样品为发病植物组织时根据固体培养基中出现的绿色菌落数来评估该发病植物的发病程度;或者
c2)提取所述油菜菌核病菌菌丝体的绿色色素,并测定其吸光度,其吸光度测定波长在610nm至630nm内选取,所述提取方法如权利要求7所述。
7.一种从油菜菌核病菌菌丝体中提取绿色色素的方法,包括以低级醇在酸性条件下浸提菌丝体以提取绿色素。
8.一种用于培养和检测油菜菌核病菌的培养基,包括3-(2-吡啶基)甲基-2-(4-氯苯基)亚氨基噻唑烷或其含亚氨基噻唑烷结构的衍生物。
9.3-(2-吡啶基)甲基-2-(4-氯苯基)亚氨基噻唑烷或其含亚氨基噻唑烷结构的衍生物在特异性检测油菜菌核病菌中的用途。
10.3-(2-吡啶基)甲基-2-(4-氯苯基)亚氨基噻唑烷或其含亚氨基噻唑烷结构的衍生物在降低油菜菌核病菌致病力中的用途。
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