[发明专利]一种豆腐果苷酯衍生物制备方法

说明书

技术领域

本发明属于酶化工领域，涉及豆腐果苷酯衍生物及其酶催化制备方法。 

背景技术

药物的化学结构修饰是基于保持药物原有的基本骨架结构，仅对其中某些官能团进行化学修饰。通过修饰改变或改善原有的理化性质，是新药研究上极其重要的手段。在药物研究和应用的过程中，常会出现一些影响药效和药物应用的因素。如药代动力学性质不理想而影响药物的吸收，导致生物利用度较低，或由于化学结构的特点所致代谢速度过快或过慢等情况；也会由于药物作用的特异性不强，选择性不高，产生毒副作用；还有一些其他原因，如化学稳定性差、溶解性能差、有不良的气味或味道、对机体产生刺激性或疼痛等。这就需要对药物的化学结构进行修饰，以克服上述缺点，增强疗效。 

从自然界中寻找活性先导化合物，再进行结构修饰，以提高其生物利用度是创新药物的一条重要思路。如作为新一代新型恶性痢疾新药蒿甲醚则是将天然产物中提取得到的青蒿素醚化后的衍生物。豆腐果苷(Helicid)，即4-甲酰苯基β-D-吡喃阿洛糖苷，最初是由山龙眼科三龙眼属(Helicia Lour.)植物的果实中分离得到的一种糖苷类化合物，具有镇静安眠、镇痛、抗炎等药理活性，但在应用中存在脂溶性较差、起效慢、生物利用度低等问题，限制了该药的应用范围。药理活性研究表明，豆腐果苷的酯衍生物具有比亲代化合物更高的抗酪氨酸酶和乙酰胆碱酯酶活性。 

由于豆腐果苷糖环上羟基众多，且反应活性相似。采用一般化学方法直接酯化时，区域选择性低，易产生大量的副产物，产物分离困难；为合成确定位置酰化的产物，需要对糖环特定羟基进行保护和去保护等操作，反应步骤多、工艺复杂；同时该方法采用碱性催化剂，易产生含碱废液，对环境造成严重污染。而酶法合成避免了繁琐的保护和去保护等复杂的反应步骤，反应条件温和、对环境友好，所得产物纯度高。因此，酶催化糖苷区域选择性酰化是一条具有广阔前景的替代途径。 

发明内容

本发明的目的在于克服母药豆腐果苷在临床上应用的不足，提供一类豆腐 果苷酯衍生物。 

本发明的另一目的在于针对现有技术存在的问题，提出酶催化合成上述化合物的方法。 

本发明以羧酸乙烯酯、酸酐、羧酸甲酯或羧酸乙酯为酰基供体，利用酶催化豆腐果苷进行酰化反应，合成豆腐果苷的单酯化合物。该方法区域选择性高，产率高、产物纯度高，工艺简单可控。 

本发明的目的通过如下技术方案实现： 

一种酶催化合成豆腐果苷酯类化合物的方法：在非水介质中，加入豆腐果苷和酰基供体，豆腐果苷的浓度为1.0-40mg／mL，酰基供体与糖苷的摩尔比为1：1-20：1，按豆腐果苷与酶制剂的质量比为0.1-10：1加入酶，在温度为30-60℃、振荡速度为100-300rpm和常压条件下，转酯化反应0.5～72小时，制得豆腐果苷的酯类化合物。 

所述酰基供体为羧酸乙烯酯、酸酐、羧酸甲酯或羧酸乙酯； 

所用的酶制剂为来源于南极假丝酵母(Candida antarctica B)、嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)、根霉(Rhizomucor miehei)、洋葱假单胞菌(Pseudomonas cepacia)、皱落假丝酵母(Candida rugosa)、米赫毛霉(Mucor miehei)中的一种或由其中两种组成的组合生物催化剂； 

所述的非质子有机溶剂优选为四氢呋喃、丙酮、乙腈、二噁烷、叔丁醇、二甲基亚砜、N，N-二甲基甲酰胺、吡啶、异丙醚、异辛烷、正己烷、正庚烷、正辛烷、正壬烷或环己烷。 

所述的含低亲核性阴离子的离子液中的阴离子优选为四氟硼酸根离子、六氟磷酸根离子、二(三氟甲基磺酰)亚胺离子或氨基酸离子；阳离子优选为1-烷基-3-甲基咪唑离子、1-烷基-2,3-二甲基咪唑离子、季铵离子、季磷离子、氨基酸离子或N-烷基吡啶离子。 

所述的非水介质为非质子有机溶剂中的两种，两种非质子有机溶剂体积比为1-19：1。 

所述的非水介质为非质子有机溶剂中的一种和含低亲核性阴离子的离子液中的一种；其中离子液在混合体系中体积含量为5-95％。 

所述分离纯化方法为反应结束后，过滤除酶、真空浓缩，再用甲醇、乙醇或者乙酸乙酯结晶，或者经过硅胶柱层析得到目标产物。 

本发明与现有的技术相比具有如下的优点：