[发明专利]单克隆抗体MERS‑4及其编码基因和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种单克隆抗体MERS-4及其编码基因和应用。

背景技术

新型冠状病毒（MERS-CoV）于2012年首次在中东地区被发现感染人类，随后这种病毒感染引起的疾病又先后出现在欧洲几个国家和地区。超过半数的感染病人均会出现严重的呼吸道疾病，其临床症状同2003年爆发的由SARS-CoV的临床症状非常相似。由于这种疾病可以人传染给人，引起了全世界的高度关注。到目前为止，还没有特异性的药物和疫苗对这种疾病进行治疗和预防。

MERS-CoV利用其表面的膜蛋白（S蛋白）进入易感细胞。S蛋白由位于N端的S1结构域和位于近膜端的S2结构域和跨膜结构域组成，其中病毒对细胞易感性是由S1结构域决定的。通过利用MERS-CoV的S1结构域进行共纯化实验，2013年初Raj的研究小组确定了dipeptideyl peptidase4(DPP4，也称为CD26)为MERS-CoV的受体。

发明内容

本发明的目的是提供一种单克隆抗体MERS-4及其编码基因和应用。

本发明提供了一种抗体，命名为单克隆抗体MERS-4，由A链和B链组成；所述A链为如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列1衍生的蛋白质；所述B链为如下（c）或（d）：（c）由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（d）将序列3的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列3衍生的蛋白质。

所述A链和所述B链通过二硫键形成单克隆抗体MERS-4。

本发明还保护一种DNA组合物，由编码所述A链的DNA分子甲和编码所述B链的DNA分子乙组成。

所述DNA分子甲可为如下（1）或（2）或（3）的DNA分子：（1）序列表中序列2自5’末端第889-2274位核苷酸所示的DNA分子；（2）在严格条件下与（1）限定的DNA序列杂交且编码所述A链的DNA分子；（3）与（1）限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码所述A链的DNA分子。上述严格条件可为在6×SSC，0.5%SDS的溶液中，在65℃下杂交，然后用2×SSC、0.1%SDS和1×SSC、0.1%SDS各洗膜一次。

所述DNA分子乙为如下（4）或（5）或（6）的DNA分子：（4）序列表中序列4自5’末端第889-1596位核苷酸所示的DNA分子；（5）在严格条件下与（4）限定的DNA序列杂交且编码所述B链的DNA分子；（6）与（4）限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码所述B链的DNA分子。上述严格条件可为在6×SSC，0.5%SDS的溶液中，在65℃下杂交，然后用2×SSC、0.1%SDS和1×SSC、0.1%SDS各洗膜一次。

本发明还保护一种表达盒组合物，由表达所述DNA分子甲的表达盒甲和表达所述DNA分子乙的表达盒乙组成。所述表达盒甲具体可如序列表的序列2所示。所示表达盒乙具体可如序列表的序列4所示。

本发明还保护一种质粒组合物，由重组质粒甲和重组质粒乙组成；所述重组质粒甲为含有所述DNA分子甲或所述表达盒甲的重组质粒；所述重组质粒乙为含有所述DNA分子乙或所述表达盒乙的重组质粒。所述重组质粒甲具体可为含有所述表达盒甲的pMD18-T载体。所述重组质粒乙具体可为含有所述表达盒乙的pMD18-T载体。

本发明还保护将所述重组质粒甲和所述重组质粒乙共转染哺乳动物细胞得到的重组细胞。所述哺乳动物细胞具体可为293T细胞。

本发明还保护培养所述重组细胞得到的抗体(IgG1抗体）。

本发明还保护一种药物，其活性成分为所述单克隆抗体MERS-4；所述药物的功能为如下（Ⅰ）、（Ⅱ）、（Ⅲ）或（Ⅳ）：（Ⅰ）治疗和/或预防MERS-CoV感染；（Ⅱ）抑制MERS-CoV增殖；（Ⅲ）抑制MERS-CoV入侵哺乳动物；（Ⅳ）治疗和/或预防MERS-CoV引起的疾病。所述“抑制MERS-CoV增殖”具体可为抑制MERS-CoV在哺乳动物细胞中的增殖。所述哺乳动物细胞具体可为Huh7细胞。