[发明专利]一种环肽化合物clavatustide A及其产生菌、制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于海洋真菌活性物质领域，具体涉及一种环肽化合物clavatustide A及其产生菌、制备方法和应用。 

背景技术

海洋微生物由于生活在压力环境下，其二次代谢产物往往具有陆地真菌二次代谢产物不具备的生物活性，近年来成为药物开发的热点。海洋微生物不仅生存竞争压力很大，其所处的海洋环境的pH范围、温度、压力、溶解氧、光线、营养和盐度等都与陆地环境不同，这是海洋微生物二次代谢产物多样性的基础（Debbab,A.;Aly,A.H.;Lin,W.H.;Proksch,P.Microb.Biotech.2010,3,544–563；Saleema,M.;Ali,M.S.;Hussain,S.;Jabbar,A.;Ashraf,M.;Lee,Y.S.Nat.Prod.Rep.2007,24,1142–1152；Wu,B.;Wu,X.;Sun,M.;Li,M.Mar.Drugs2013,11,2713-2721.）。 

海洋真菌作为海洋微生物的重要组成部分，在药物合成、石油降解、环境修复等方面具有重要作用。海洋真菌既具有真核生物典型的蛋白修饰性能，又具有微生物操作上简便、快速的优点，作为新的真核生物表达系统具有巨大的潜能和广阔的应用前景。近年来随着对海洋微生物研究的深入，从海洋真菌中发现了越来越多的抗肿瘤活性物质，海洋真菌成为了继海洋放线菌之后的又一研究热点。 

沼田敦等（徐赤，顾谦群，崔承彬.2001年.海洋微生物抗肿瘤代谢产物的研究进展[J].中国海洋药物.6:44-49.）对从浒苔属海藻Enteromorpha intestinalis体表分离到的一株青霉菌进行了一系列研究。将该菌株置于含2%葡萄糖、1%蛋白胨及0.5%酵母膏的人工海水培养基中，27℃培养3周，首先分离得到2个细胞毒代谢产物Communesins A和B，二者结构上仅酰基侧链存差异，但活性上却相差了近10倍。 

沼田敦等（徐赤，顾谦群，崔承彬.2001年.海洋微生物抗肿瘤代谢产物的研究进展[J].中国海洋药物.6:44-49.）还从分离于海鱼 Pseudolabrus japonicus胃肠道的曲霉Aspergillus fummigatus菌丝体中分离到一系列细胞毒化合物Fumiquinazolines A～G，对P385细胞有中等细胞毒性。Fenieal等人从加勒比海绿藻Penicillus capitatus体表分离的Aspergillus versicolor得到四个倍半萜硝基苯酯化合物，其中9a，14-二羟基-6对硝基苯甲酸肉桂酯对NCI的60个人类肿瘤细胞群的IC₅₀的平均值为1.1mg/L，但对5种肾癌细胞（786-0，ACHN，CAK-1，TK-10，VO-31）有选择性毒性，平均IC₅₀为0.51mg/L。 

海洋热液口是地球上最活跃的环境（Thornburg,C.C.;Zabriskie,T.M.;McPhail,K.L.J.Nat.Prod.2010,73,489–499.），热液口螃蟹（Xenograpsus testudinatus）就生活在极端、毒性、布满硫化物的热液口附近。这种热液口螃蟹在台湾龟山岛被发现（eng,M.-S.;Ng,N.K.;Ng,P.K.L.Nature2004,432,969.），迄今为止，没有人研究这种热液口螃蟹的附生真菌的代谢产物。 

发明内容

本发明提供了一种环肽化合物clavatustide A，该化合物从热液口螃蟹Xenograpsus testudinatus附生棒曲霉Aspergillus clavatus C2WU发酵培养物中提取获得，具有较强的抗肿瘤活性。 

一种环肽化合物clavatustide A，结构式如式（Ⅰ）所示： 

本发明还提供了一种棒曲霉，分类命名为棒曲霉（Aspergillus clavatus），株号为C2WU，该菌株已于2013年9月14日保藏于位于武汉市珞珈山武汉大学的中国典型培养物保藏中心（China Center for Type Culture Collection，CCTCC），保藏号为：CCTCC No.M2013421。 

所述棒曲霉（Aspergillus clavatus）C2WU是从热液口螃蟹（Xenograpsus testudinatus）中分离得到的，是热液口螃蟹（Xenograpsus testudinatus）的附生真菌。