[发明专利]提高人参皂苷M1与癸酰氯单酯化选择性的合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及人参皂苷M1的氯硅烷保护反应，属于中药化学领域。 

背景技术

人参具有抗衰老、抗炎、抗过敏、降血糖、修复神经损伤和保肝等作用。近年来的研究表明，人参皂苷具有抗肿瘤的作用，大部分都是以Rg₃、Rh₁、Rh₂等为主要研究对象。他们在促进肿瘤细胞凋亡和肿瘤细胞分化等方面表现出显著作用，不同结构的人参皂苷在抗肿瘤活性方面存在差异，其中二醇型人参皂苷抗肿瘤活性明显强于三醇型人参皂苷。随着皂苷药代动力学研究的深入，发现真正发挥抗肿瘤作用的是皂苷动物体内的次级代谢产物Compound K又称人参皂苷M1，人参皂苷Compound K属于原人参二醇型皂苷。研究表明人参皂苷Compound K的酯化衍生物具有更好的抗肿瘤活性。EM1(M1的硬脂酸酯、棕榈酸酯和油酸酯的混合物)与M1相比具有更强的抗肿瘤活性。但是EM1来源有限，难以分离纯化。而利用化学合成技术获得的系列M1衍生物水溶性差。采用酯键、醚键等方式给M1的修饰基引入水溶性较好的基团，使其兼具脂溶性和水溶性，人参皂苷M1的结构式上有六个羟基，从而选择性酯化和提高单酯化产率具有很重要的研究价值。 

氯硅烷保护-去保护过程广泛应用于羟基的保护反应，用氯硅烷将Compound K的糖苷基上最活泼的6号位羟基保护上，再与酰氯发生酯化反应，根据动力学和基团位阻大小对酯化位置的影响，从而优化了单酯化反应的选择性，易于分离提纯，提高酯化反应产率。 

发明内容

人参皂苷M1和叔丁基二甲基氯硅烷为原料合成人参皂苷M1的单醚化产物，将其产物与等当量的癸酰氯在冰水浴，氮气保护，二氯甲烷为溶剂，三乙胺为敷酸剂，DMAP催化的条件下发生单酯化反应，最后用四丁基氟化铵脱去叔丁基二甲基硅基。 

本发明的积极效果在于用氯硅烷将Compound K的糖苷基上最活泼的6号位羟基保护上，再与酰氯发生酯化反应，根据动力学和基团位阻大小对酯化位置的影响，从而优化了单酯化反应的选择性，易于分离提纯，提高酯化反应产率。 

实验：人参皂苷M1与癸酰氯单酯化选择性的合成 

仪器与试剂：

仪器：Agilent 1260 LC高效液相色谱仪；尼高丽550型傅里叶变换红外光谱仪；RE52CS-1旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；SHZ-D(Ⅲ) 旋转水式真空泵，巩义市英峪予华仪器厂；ETS-D4加热磁力搅拌器，德国IKA公司；BT 323S电子天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司；FH-203三用紫外分析仪 (UV)，上海精科实业有限公司；KQ-50B超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；柱层析硅胶 (200-300目)，烟台牟平区康比诺化学试剂厂；薄层层析硅胶 (GF254)，烟台牟平区康比诺化学试剂厂；

试剂：叔丁基二甲基氯硅烷，阿法埃莎化学有限公司；癸酰氯，阿法埃莎化学有限公司；三乙胺，天津科密欧化学试剂有限公司；二氯甲烷，国药集团化学试剂有限公司；无水硫酸钠，天津科密欧化学试剂有限公司；石油醚，天津科密欧化学试剂有限公司；乙酸乙酯，天津科密欧化学试剂有限公司

1．人参皂苷M1与叔丁基二甲基氯硅烷的单醚化合成

在装有电磁搅拌器的25mL休良克瓶中，加入100 mg人参皂苷M1，5倍当量的叔丁基二甲基氯硅烷，氮气保护，冰水浴下加入适量的三乙胺溶解，反应10 min后，升至室温，薄层色谱法监测反应进程，24h反应完毕后，加入饱和氯化铵溶液停止反应。经CH₂Cl₂(3×10 mL)萃取， Brine洗有机相，无水Na₂SO₄干燥，浓缩溶剂。

柱层析纯化过程：硅胶量，6g；流动相，甲醇/二氯甲烷； 

            梯度洗脱后得到Rf 值为9/34(8%MeOH/CH₂Cl₂)的产物109 mg产物为乳白色固体，为人参皂苷M1与叔丁基二甲基氯硅烷的单醚化合成产物人参皂苷M1的叔丁基二甲基硅醚。

2．人参皂苷M1的叔丁基二甲基硅醚与癸酰氯的单酯化反应