[发明专利]一种制备酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖的方法

权利要求书

1.一种制备酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖的方法，步骤如下：

①酶-碱法对啤酒酵母进行破壁

将干酵母粉加入到缓冲溶液中，使其浓度为75-85 g/L，调初始pH为5.5-6.5；按木瓜蛋白酶与中性蛋白酶以酶活单位8-10:1，加入木瓜蛋白酶与中性蛋白酶，使每克干酵母粉加入30000-35000U，60℃酶解0.5-1.5 h；向水解液中加入NaOH碱解，使其质量分数为1-2%，50-55℃恒温0.5-1.5 h，得水解液；

②酵母多糖的分离纯化

将①制得的水解液经4000r/min离心10min，所得沉淀经Seveage法脱蛋白、石油醚脱脂，浓缩干燥得酵母葡聚糖产品，所得上清液依次经分子量为30000Da、3000Da的超滤膜超滤，其截留液经Seveage法脱蛋白、浓缩干燥得酵母甘露聚糖，其滤液经活性炭脱色、Seveage法脱蛋白浓缩干燥得海藻糖。

2.如权利要求1所述的制备酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖的方法，所述酶解，为加入木瓜蛋白酶与中性蛋白酶催化酵母细胞壁蛋白水解。

3.如权利要求1所述的制备酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖的方法，所述碱解，为加入NaOH水解酵母细胞壁蛋白。

4.如权利要求1所述的制备酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖的方法，所述干酵母粉是将新鲜的啤酒酵母用自来水洗3-4次后，2500r/min离心5min，沉淀50℃烘干，粉碎，过80目筛。

5.如权利要求1所述的制备酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖的方法，所述缓冲液为磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液。

6.如权利要求1所述的制备酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖的方法，所述Seveage法脱蛋白，是去除游离蛋白的有效方法，在粗多糖溶液中加入氯仿—正丁醇混合溶液,将游离蛋白变性成为不溶性物质,经离心分离去除。

7.如权利要求1所述的制备酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖的方法，所述酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖，其提取率质量分数分别为13-15%、10-12%、7-10%，纯度质量分数分别为86-92%、90-94%、96-99%。

8.如权利要求1所述的制备酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖的方法，所述葡聚糖、甘露聚糖制备时间为2-3h。