[发明专利]一种灭螺细菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种微生物，具体地，本发明涉及的是一种灭螺细菌及其应用。 

背景技术

钉螺作为血吸虫唯一的中间宿主,其繁衍和分布与血吸虫病的流行传播密切相关，所以抑螺灭螺被认为是阻止血吸虫病传播的重要途径。目前主要的灭螺剂是化学药物类，这类药物容易对环境造成不可逆破坏。近年来动物体内微生物群落结构得到广泛的关注和研究，国内外学者经过研究发现动物体内存在大量的微生物,这些微生物在动物的生长、发育、健康等方面都起到重要作用，因此，本发明将研究的方向对准了钉螺体内的微生物群落，希望能找到一种选择性强、对环境影响较小的生物灭螺剂，以替代传统化学灭螺剂，保护环境。 

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种灭螺细菌及其应用，以提供一种选择性强、对环境影响较小的生物灭螺剂。 

本发明是通过以下技术方案实现的： 

一种灭螺细菌,Comamonas sp.X3，所述灭螺细菌的生物保藏号为CCTCC M 2013442，属于丛毛单胞菌属。 

本发明的灭螺细菌，Comamonas sp.X3，已于2013年9月25日包藏于中国典型培养物保藏中心（简称CCTCC；地址：中国武汉，武汉大学；邮编：430072）保藏编号为CCTCC M2013442。 

本发明的灭螺细菌CCTCC M 2013442是从濒死的不含血吸虫的阴性钉螺中筛选获得的，其生物学特征如下： 

（1）形态学特征：该细菌革兰氏染色为阴性，在光学显微镜16×100油镜下观察该细菌呈短杆状，单个或成对分布。 

（2）培养特征：在YEB固体培养基中生长良好,菌落圆润,初期呈黄色半透明,后期呈深黄色,易挑起，在YEB液体培养基中培养时随着培养时间延长，培养液由透明的浅黄色变为浑浊的深黄色。 

所述灭螺细菌CCTCC M 2013442的16SrRNA序列如SEQ ID NO.1所示，其中所述16srRNA序列有472个碱基，将序列输入GenBank数据库中进行BLAST比对处理，结果发现，该16srRNA序列与丛毛单胞菌属细菌AS-7（Comamonas sp.AS-7）的16srRNA序列（GenBank登录号：KC013939.1）同源性为99%，结合形态学特征和培养特征鉴定该灭螺细菌CCTCC M 2013442属于丛毛单胞菌属细菌（Comamonas sp.）。 

本发明还提供了上述灭螺细菌CCTCC M 2013442在制备生物灭螺剂中的应用，所述灭螺细菌的发酵液作为生物灭螺剂杀灭钉螺。 

本发明相比现有技术具有以下优点：本发明提供了一种灭螺细菌及其应用，该灭螺细菌CCTCC M 2013442是从自然界中的濒死钉螺中筛选获得的，能够作为生物灭螺剂快速有效地杀灭钉螺，可直接作为生物灭螺剂使用，用该灭螺细菌CCTCC M 2013442制备的生物灭螺剂与传统化学灭螺剂相比，制备方法简单，成本低，对环境友好。 

具体实施方式

下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。 

实施例1 

灭螺细菌CCTCC M 2013442菌株的筛选： 

1、培养基的配制： 

1）YEB液体培养基：牛肉浸膏为5.0g/L，酵母膏为1.0g/L，蛋白胨为5.0g/L，MgSO₄·7H₂O为4g/L，蔗糖为5.0g/L，pH7.0～7.5； 

2）YEB固体培养基：将上述YEB液体培养基中加入15g/L的琼脂。 

2、筛选步骤： 

1）在无菌条件下，取8只濒死阴性钉螺，用体积分数为75%的酒精浸泡3分钟，无菌生理盐水冲洗3遍后，将钉螺捏碎并研磨，加入2mL的无菌生理盐水，获得组织浆液； 

2）将步骤1）的组织浆液接种到100mL的YEB液体培养基中，37℃培养12～16小时，培养的转速为200rpm，获得培养液； 

3）按体积计，将步骤2）的培养液用无菌生理盐水依次稀释为10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6和10^-7，获得稀释液；