[发明专利]一种通过复合诱变对DHA菌株进行选育的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种实验方法，具体来说，是指一种通过复合诱变对DHA菌株进行选育的方法。 

背景技术

目的菌种蹄选一般有两条途径：一是从自然界中某些含有菌群的材料中，同特定的操作过程分离蹄选得到所需有用菌株是以已有的菌株包括保藏菌株为出发菌株，通过诱变选育方法得到所需要的菌株，例如从不同地区的土壤筛选得到30余株可以转化甘油生产二轻基丙酮的菌株；自然选育可以保持菌株的稳定性，达到纯化菌种的目的，但一般产量较低，不能满足工业化生产需求，为了提高菌种生产能力，还得进一步依靠诱变和分子手段。二是以已有的菌株包括保藏菌株为出发菌株，通过诱变选育方法得到所需要的菌株，釆用紫外线和6Co射线对G  进行复合诱变选育，筛选到一株耐甘油浓度高，转化效率高的变异菌株。自然筛选一般都选择土壤作为菌种蹄选材料来源，自然界土壤中蕴藏着丰富的微生物资源，土壤中栖息的大量微生物菌群已经成为分离各种抗生素、氨基酸、酶、生理活性物质等产生菌分离蹄选的主要材料来源。 

发明内容

为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案： 

一种通过复合诱变对DHA菌株进行选育的方法，步骤如下：选择初始目的菌株；然后在新鲜的斜面上进行菌种栽植；制备细菌悬液，要求其PH保持碱性；然后对其紫外诱变以及化学诱变；通过平板进行分离，是菌落富集；再对其进行筛选，对于正突变的变异菌株，立即进行低温保藏。

本发明中， 其中培养基中，需要加入一定浓度的KH2PO4。 

本发明中，斜面保藏培养基中，葡萄糖与碳酸钙溶液的质量浓度比为5:1  

本发明的有益效果是，条件稳定，操作简易，纯度较高，可以得到转化效率高的变异菌株。

具体实施方式

一种通过复合诱变对DHA菌株进行选育的方法，步骤如下：选择初始目的菌株；然后在新鲜的斜面上进行菌种栽植；制备细菌悬液，要求其PH保持碱性；然后对其紫外诱变以及化学诱变；通过平板进行分离，是菌落富集；再对其进行筛选，对于正突变的变异菌株，立即进行低温保藏。 

其中培养基中，需要加入一定浓度的KH2PO4。 

斜面保藏培养基中，葡萄糖与碳酸钙溶液的质量浓度比为5:。 

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。