[发明专利]一种马属动物冷冻精液解冻液

说明书

技术领域

本发明涉及动物精液保存的技术领域，特别涉及一种马属动物冷冻精液解冻液。

背景技术

精液冷冻保存与人工授精技术的结合在现代养殖业生产中发挥着极其重要的作用，应用冷冻精液进行人工授精可以不受时间、地域、品种及个体体格的限制，并且大量减少公畜饲养量，降低生产成本，提高优良种公畜的利用率，为养殖业带来巨大的经济效益。同时，精液冷冻技术的发展和冷冻精液的使用在品种引进、杂交改良，以及提高繁殖性能、疾病控制及遗传多样性保护方面具有重要的意义。

解冻液在冷冻精液的使用过程中是必不可少的，可以补充精子的营养，减少精液粘稠度，降低异物对精子的影响，同时缓和代谢产物的危害作用；另外还能够保护精子，增强其抵抗低温打击和抗氧化的能力，减少冷冻所造成的损伤。

近年来，家畜冷冻精液解冻液的研究不断取得可喜的成果，尤其是在牛、羊等反刍动物方面。马属动物冷冻精液解冻液的研究也日渐成效，但是仍然存在诸多弊端，主要表现在精液解冻效果不稳定，受胎率低；因此开发出解冻效果好，成本低，受胎效果好的冷冻精液解冻液对人工授精而言有重要的经济效益。

发明内容

为了解决传统的精液解冻液对精子活力恢复差、受胎率低及现用现配等问题，本发明提供了一种马属动物冷冻精液解冻液。

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种马属动物冷冻精液解冻液，所述解冻液包括A液和脱脂奶，所述A液包括葡萄糖、棉子糖、D-乳糖单水合物、柠檬酸三钠、柠檬酸钾和HEPES。

其中，所述A液和所述脱脂奶的混合体积比例优选为1:1。

每500ml的所述A液中，各组分的含量为：葡萄糖22~26g、棉子糖1.5~1.7g、D-乳糖单水合物1.5~1.7g、柠檬酸三钠Na₃C₆H₅O₇·2H₂O 0.2~0.25g、柠檬酸钾0.35~0.45g、HEPES 4.6~4.8g。

所述葡萄糖为无水葡萄糖，其分子式为C₆H₁₂O₆；所述棉子糖的分子式为C₁₈H₃₂O₆·5H₂O；所述D-乳糖单水合物的分子式为C₁₂H₂₂O₁₁·H₂O；所述柠檬酸钾的分子式为K₃C₆H₅O₇·H₂O；所述HEPES的分子式为C₈H₁₈N₂O₄S。

本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：使用本发明马属动物冷冻精液解冻液进行精液的解冻，效果明显优于传统的解冻液，马属动物精液的解冻效果好，延长了稀释精液中精子的存活时间，保证精子的活率和精子顶体完整率，增强受精能力，充分提高了精液的利用率和优良公畜配种的效率；本发明的解冻液配制简单，使用方便，可置于0-5℃保存，随用随取且可一液多用，省时省力，适于规模化生产和应用。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步描述。

实施例1 

称取葡萄糖24g、棉子糖1.6g、D-乳糖单水合物1.6g、柠檬酸三钠Na₃C₆H₅O₇·2H₂O 0.24g、柠檬酸钾0.4g和HEPES 4.7g，放入无菌烧杯中，加双蒸水溶解后，定容、过滤、分装、灭菌、密封，即得A液；将经过严格灭菌、密封的A液标记配制时间，置于0~5℃保存，随用随取；取适量的A液加入等量体积的脱脂奶混合均匀后，得到本实施例1的解冻液。

对比试验1

将传统的解冻液葡萄糖-卵黄稀释液（对照组1）和牛奶解冻液（对照组2），与实施例1的解冻液（实施例组1）分别解冻马的冷冻精液。解冻后在0~10小时内观察对照组1、对照组2和实施例组1的精子活力，每隔2个小时测定精子的活率，结果如表1所示。

表1：不同解冻液对马冻精解冻后活率的影响