[发明专利]一种马属动物冷冻精液稀释液及其配制方法

说明书

技术领域

本发明涉及动物精液冷冻保存的技术领域，特别涉及一种马属动物冷冻精液稀释液及其配制方法。 

背景技术

精液冷冻保存与人工授精技术的结合在现代养殖业生产中发挥着极其重要的作用，应用冷冻精液进行人工授精可以不受时间、地域、品种及个体体格的限制，并且大量减少公畜饲养量，降低生产成本，提高优良种公畜的利用率，为养殖业带来巨大的经济效益。同时，精液冷冻技术的发展和冷冻精液的使用在品种引进、杂交改良，以及提高繁殖性能、疾病控制及遗传多样性保护方面具有重要的意义。 

稀释液在冷冻精液的制作过程中是必不可少的，可以补充精子的营养，减少精液粘稠度，降低异物对精子的影响，同时缓和代谢产物的危害作用；另外还能够保护精子，增强其抵抗低温打击和抗氧化的能力，减少冷冻所造成的损伤。 

近年来，家畜精液稀释液的研究不断取得可喜的成果，尤其是在牛、羊等反刍动物方面。马属动物精液稀释液的研究也日渐成效，但是仍然存在诸多弊端，主要表现在精液冷冻效果不稳定，受胎率低；因此开发出保存效果好，成本低，受胎效果好的冷冻精液稀释液对人工授精而言有重要的经济效益。 

发明内容

为了解决传统的冷冻精液稀释液对精子活力的保存效果差、受胎率低等问题，本发明提供了一种马属动物冷冻精液稀释液及其配制方法。 

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种马属动物冷冻精液稀释液及其配制方法。所述稀释液包括葡萄糖、乳糖、柠檬酸钠、碳酸氢钠和EDTA。 

每500ml的所述稀释液中，各组分的含量为：葡萄糖20~25g、乳糖1.2~2.0g、柠檬酸钠0.2~0.25g、碳酸氢钠0.35~0.45g和EDTA 0.45~0.55g。 

所述葡萄糖为无水葡萄糖，其分子式为C₆H₁₂O₆；所述乳糖的分子式为C₁₂H₂₂O₁₁；所述柠檬酸钠的分子式为Na₃C₆H₅O₇·2H₂O。 

本发明还提供了上述马属动物精液稀释液的配制方法，所述配制方法包括： 

（1）称取所需要量的葡萄糖、乳糖、柠檬酸钠、碳酸氢钠和EDTA，放入无菌烧杯中，加双蒸水溶解后，定容、过滤、分装、灭菌、密封即得；

（2）将经过严格灭菌、密封的稀释液标记配制时间，置于0~5℃保存；

（3）使用前向所述稀释液中分别按1000单位/ml的量添加青霉素和1000ug/ml的量添加双氢链霉素，分别按2%和2.5%的量添加卵黄和甘油，混匀即可。

本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：使用本发明马属动物冷冻精液稀释液进行精液的冷冻保存，效果明显优于传统的稀释液，马属动物精液的保存效果好，保证精子的活率和精子顶体完整率，增强受精能力，充分提高了精液的利用率和优良公畜配种的效率；本发明的基础液配制简单，使用方便，适于规模化生产和应用。 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步描述。 

实施例1 

称取葡萄糖24g、乳糖1.2g、柠檬酸钠0.25g、碳酸氢钠0.45g和EDTA 0. 5g，放入无菌烧杯中，加双蒸水溶解后，定容、过滤、分装、灭菌、密封即得；将经过严格灭菌、密封的稀释液标记配制时间，置于0~5℃保存，随用随取。使用前向稀释液中分别按1000单位/ml的量添加青霉素和1000ug/ml的量添加双氢链霉素，分别按2%和2.5%的量添加卵黄和甘油，并混合均匀。

对比试验1 

将传统的稀释液葡萄糖-卵黄稀释液（对照组1）和牛奶稀释液（对照组2），与实施例1的稀释液（实施例组1）分别稀释马的精液并制作冻精。24小时后测定精子的活率，结果如表1所示。