[发明专利]一种从深海鱼中提取甘油三酯型DHA和EPA的方法有效

专利信息
申请号: 201310589856.2 申请日: 2013-11-20
公开(公告)号: CN104651422A 公开(公告)日: 2015-05-27
发明(设计)人: 陈丽娟;王践云;窦庶华;杜丽娟;钟舟 申请(专利权)人: 深圳市中科海世御生物科技有限公司
主分类号: C12P7/64 分类号: C12P7/64
代理公司: 深圳中一专利商标事务所 44237 代理人: 张全文
地址: 518102 广东省深圳市*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 深海鱼 提取 甘油 三酯型 dha epa 方法
【说明书】:

技术领域

发明属于生物制药技术领域,尤其涉及一种从深海鱼中提取甘油三酯型DHA和EPA的方法。

背景技术

深海鱼,如金枪鱼等是一种大型远洋性重要商品食用鱼。由于深海鱼必须时常保持快速游动,才能维持身体的供给,加上只在海域深处活动,因此肉质柔嫩鲜美,且不受环境污染,是现代人不可多得的健康美食。深海鱼的加工业成为一个重要的产业,但是深海鱼在加工过程中存在品质难以控制、边角料利用程度低、生产能耗高、原料损失严重等一系列重大问题,企业经济损失较大。因此对深海鱼加工过程产生的下脚料增加营业收入,实现经济价值。鱼油的应用非常广泛,可应用于保健、医药、食品、化工以及饲料等领域。通过将深海鱼的下角料用于制备鱼油是一种非常好的实现经济效益的方式。

鱼油中n-3多不饱和脂肪酸(n-3PUFA)在人体中具有重要的生物学意义,其特征脂肪酸二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的生理活性已经明确,EPA具有预防冠心病、降血压、消除疲劳、预防动脉粥样硬化和脑血栓、抗癌等生理活性,DHA能显著地促进婴儿的智力发育,改善大脑机能,提高记忆力,EPA和DHA是生产预防心血管疾病和婴儿益智食品的良好基料。

鱼油中的多烯脂肪酸,包括EPA和DHA,是属热及化学不稳定物质,将其分离提纯及其困难,现有常用的分离纯化的技术有精馏分离技术、分子蒸馏技术、色谱分离技术、低温冷冻技术、金属盐沉淀技术和鱼油交酯化,但都存在各自的不足:

其中,传统精制技术的主要工艺流程包括脱胶、脱酸、脱色、脱臭等,该精制工艺繁琐,产品色泽不理想,并且在此提取过程中所需要的加热容易导致油脂氧化酸败。精馏分离技术,是目前使用最广泛的工业化分离技术,其原理是利用混合脂肪酸中各组分挥发性不同,在同一温度下依不同饱和蒸汽压的性质而得到分离,但该方法操作温度较高,时间较长,致使不饱和脂肪酸发生热敏反应,影响产品质量和收率。分子蒸馏技术,在极高的真空条件下,依据液体分子受热会从页面逸出,在气相中分子运动的平均自由程不同而得以分离,该种技术操作温度低,被分离物质不易分离或者聚合,且分子蒸馏装置一次性投资较大,且维护费用较高。超临界流体技术设备投资大,抽提压力高,且传统超临界萃取装置主要是由单一高压反应釜和分离釜组成的,仅能进行单一的分离反应,此外,超临界萃取无法实现将EPA、DHA与其他分子量接近的饱和或低浓度不饱和脂肪酸分离。色谱分离技术,是一种现代分离、分析检测方法,可用于脂肪酸分离纯化和检测的色谱方法有气相色谱、薄层色谱、高效液相色谱等,多数情况下用简易的硅胶色谱进行分离,该法能将极性相近,结构相似的不饱和脂肪酸分离,主要缺点是耗能大,操作成本高。低温冷冻技术,是根据脂肪酸混合物在过冷有机溶剂中溶解度的不同而达到分离的目的。饱和脂肪酸在有机溶剂中的溶解度与碳链的长度成反比,而同一不饱和度的脂肪酸,碳链越长,溶解度越低,对同样碳链数目的不饱和脂肪酸,随双键的增加,溶解度增加。该种技术主要缺点是需回收大量溶剂,分离效率不高,需要极低温的冷却设备,成本较高。金属盐沉淀技术,是利用饱和脂肪酸、低不饱和脂肪酸以及EPA、DHA的金属盐在某种有机溶剂中溶解度的不同进行分离,常用的为硝酸银络合法,该方法操作简单、条件温和、周期短、收率高,但是硝酸银昂贵、回收困难、生产成本高。鱼油交酯化技术,是指在碱性催化剂存在时,通过乙醇置换油脂中的甘油,制取乙酯化的高不饱和脂肪酸(EPA和DHA)。乙酯型ω-3PUFA在人体中消化和吸收比较困难,而且可能存在安全隐患。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从深海鱼中提取甘油三酯型DHA和EPA的方法,旨在解决现有技术从鱼油中提取的DHA和EPA纯度低、酸值高、颜色深需脱色、且得到DHA和EPA为DHA和EPA的单甘油酯、三甘油酯等混合物或乙酯类鱼油且成本高的问题。

本发明是这样实现的,一种从深海鱼中提取甘油三酯型DHA和EPA的方法,包括以下步骤:

将深海鱼绞碎成肉浆,加水后在无氧条件下进行加热处理后,使用胰蛋白酶将其进行第一酶解反应后,进行固液分离,收集滤液,得到粗鱼油;

利用脂肪酶1LVK-F100将所述粗鱼油进行第二酶解反应,得到游离脂肪酸;

在水浴条件下,将尿素的甲醇或乙醇饱和溶液与所述游离脂肪酸进行混合后得到混合物溶液,将所述混合物溶液进行降温处理至温度为4℃-10℃、保温静置处理48h-72h后,进行过滤处理得到滤液,将所述滤液进行萃取处理并收集有机层,得到浓缩的含EPA、DHA的多不饱和脂肪酸;

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