[发明专利]一种提取藻蓝蛋白的方法有效
申请号: | 201310592174.7 | 申请日: | 2013-11-22 |
公开(公告)号: | CN103554250A | 公开(公告)日: | 2014-02-05 |
发明(设计)人: | 熊巍;刘海周;许瑞珂 | 申请(专利权)人: | 云南蓝钻生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16 |
代理公司: | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人: | 徐玲菊 |
地址: | 650503 云南省昆明*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提取 蛋白 方法 | ||
1.一种提取藻蓝蛋白的方法,其特征在于经过下列各步骤:
(1)将新鲜或干燥的钝顶螺旋藻的藻体制成螺旋藻粉;
(2)按螺旋藻粉:缓冲溶液=1:0.8~1:1.2的质量比,在步骤(1)的螺旋藻粉中加入缓冲溶液,搅匀,在压力为40~70MPa下进行高压匀质破壁2~5次,得到螺旋藻破壁液;
(3)将步骤(2)所得螺旋藻破壁液进行离心分离后,取上清液,然后将上清液依次用2μm、0.45μm及0.2μm的微滤膜进行过滤,过滤后得到藻蓝蛋白粗提液;
(4)将步骤(3)所得藻蓝蛋白粗提液,以2~5mL/min的流速通过组合型树脂进行脱色纯化,收集洗脱液,即为藻蓝蛋白提取液;所述组合型树脂的用量是螺旋藻粉体积的0.8~2.0倍;
(5)将步骤(4)所得藻蓝蛋白提取液进行高速离心喷雾干燥,收集粉末,即得到藻蓝蛋白。
2.根据权利要求1所述的提取藻蓝蛋白的方法,其特征在于:所述步骤(2)的缓冲溶液是pH为6.5、浓度为0.1M的磷酸钠溶液。
3.根据权利要求1所述的提取藻蓝蛋白的方法,其特征在于:所述步骤(3)的离心分离是在转速为3500~5000r/min的条件下离心分离20~30min。
4.根据权利要求1所述的提取藻蓝蛋白的方法,其特征在于:所述步骤(4)的组合型树脂为D900型离子交换树脂、HPD-300L型树脂、BEHP-3型大网孔非极性吸附树脂、BEHP-4型大网孔非极性吸附树脂、D112阳树脂中的两种或两种以上的组合,且组合比例是任意的。
5.根据权利要求1所述的提取藻蓝蛋白的方法,其特征在于:所述步骤(5)的高速离心喷雾干燥是在加液速度为2~8L/h、进风温度为180~320℃、出风温度为80~90℃、干燥温度为160~220℃的条件下进行的。
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