[发明专利]染色体核型分析骨髓G带制备方法

权利要求书

1.一种染色体核型分析骨髓G带制备方法，包括步骤：

(A)接种：将骨髓细胞接种到骨髓细胞培养基中；

(B)终止培养：将溴化乙锭和秋水仙胺加入到步骤（A）所述的培养基中；

(C)收取骨髓细胞培养物，用于染色体制片；

(D)染色体标本制片：利用染料染色后获得具有G显带的染色体标本。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，溴化乙锭的浓度为1.5～5.5mg/ml，秋水仙胺的浓度为8～15μg/ml。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，以培养基用量为5ml计，加入50μl的溴化乙锭和25μl的秋水仙胺。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，以培养基用量为5ml计，加入将50μl浓度为3mg/ml的溴化乙锭和25μl浓度为12μg/ml的秋水仙胺。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，终止培养时，将溴化乙锭和秋水仙胺加入培养基，摇晃均匀后37℃，5.0%CO₂培养箱孵育1小时。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，收取骨髓细胞培养物的方法包括：

  （1）离心获得骨髓细胞；

  （2）将步骤（1）中的骨髓细胞进行低渗处理；

  （3）将步骤（2）中的骨髓细胞用固定液进行预固定；

  （4）将步骤（3）中的骨髓细胞用固定液固定；

（5）将固定后的骨髓细胞制成浓度适中的悬液用于G带制片。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，染色体制片的方法包括：

   a．玻片的准备；

   b．滴片；

   c．烤片老化；

   d．配制消化液；

e. 配制染色液；

   f．制片。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的染料为Giemsa。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述的Giemsa染料与pH6.8的磷酸缓冲液按照1:20混合使用。

10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将骨髓细胞以1～3×10⁶个/ml的密度接种到骨髓细胞培养基中，放入37℃，5.0%CO₂培养箱培养24小时。