[发明专利]骨髓染色体提取试剂盒

说明书

技术领域

本发明属生命科学和生物技术领域，特别涉及一种骨髓染色体提取的试剂盒，用于进行骨髓染色体核型分析。

 

背景技术

G显带因为染色体主要是被Giemsa染料染色后而显带，故称之为G显带技术，其所显示的带纹分布在整个染色体上。人们将用各种不同的方法，以及用不同的染料处理染色体标本后，使每条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为显带技术（banding technique）。本世纪70年代以来，显带技术得到了很大发展，且在众多的显带技术中（Q带、G带、C带、R带、T带），G带是目前被广泛应用的一种带型。

研究发现，人染色体标本经胰蛋白酶、Na0H、柠檬酸盐或尿素等试剂处理后，再用Giemsa染色，可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹，这就是染色体的G带。每条染色体都有其较为恒定的带纹特征，所以G显带后，可以较为准确的识别每条染色体，并可发现染色体上较细微的结构畸变。

近年来，随着分子生物学与细胞遗传学的发展，骨髓染色体核型分析在血液系统疾病的诊断、治疗和预后中发挥了越来越重要的作用。骨髓染色体的制备因骨髓中有大量脂肪颗粒的干扰, 骨髓中各种细胞系的细胞周期不固定, 不统一, 难以区别对待而使得骨髓染色体分裂指数低, 染色体短粗, 分散度差，且成本较高。

因此，建立一种具有分裂相多、分散度好、带纹清晰、长度适中等特征的骨髓G带制作方法尤为重要。

 

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种骨髓染色体提取试剂盒，所述试剂盒包括试剂1、试剂2、试剂3和试剂4组成的液体型试剂，其中试剂1的各组分及浓度范围为：

    基础培养基为RPMI1640，所述的各添加成分用量为：

青霉素/链霉素                              5-15ul/ml 

胎牛血清                                 60-140 ul/ml

人类淋巴瘤细胞培养物                     60-140 ul/ml

试剂2的成分及浓度范围为：

溴化乙锭                      1.5～5.5mg/ml

试剂3的成分及浓度范围为：

秋水仙胺                      8～15μg/ml

试剂4的成分及浓度范围为：

氯化钾                       0.050～0.090mol/L

进一步地，所述试剂1的各组分及浓度范围为：

    基础培养基RPMI1640，所述的各添加成分用量为：

青霉素/链霉素                            8-12ul/ml 

胎牛血清                                 80-120 ul/ml

人类淋巴瘤细胞培养物                     80-120 ul/ml

所述试剂2的成分及浓度范围为：

溴化乙锭                      2.5～4.5mg/ml

所述试剂3的成分及浓度范围为：

秋水仙胺                      10～13μg/ml

所述试剂4的成分及浓度范围为：

氯化钾                       0.060～0.080mol/L

进一步地，所述试剂1的各组分及浓度范围为：

基础培养基RPMI1640，所述的各添加成分用量为：

青霉素/链霉素                           8ul/ml 

胎牛血清                                96ul/ml

人类淋巴瘤细胞培养物                    96ul/ml

所述试剂2的成分及浓度范围为：

溴化乙锭                      3 mg/ml

所述试剂3的成分及浓度范围为：

秋水仙胺                      12μg/ml

所述试剂4的成分及浓度范围为：

氯化钾                       0.075mol/L