[发明专利]侧孢芽孢杆菌制剂

说明书

本申请是一件分案申请，是申请号为201010103139.0，申请日为2010年1月26日，发明名称为“微生物叶面增效剂”的分案申请。

技术领域

本发明属于微生物制剂技术领域，具体是指侧孢芽孢杆菌制剂。 

背景技术

我国微生物肥料的研发和应用始于20世纪50年代，由于研究经费匮乏，长期以来，微生物肥料产业整体水平不高、技术创新不足、产品质量不稳定、利用程度较低等问题。目前世界上已有70多个国家和地区开发应用微生物肥料，在欧美发达国家农业生产中，微生物肥料的使用已达肥料总量的20%以上，总产量以10%~20%的速度递增。而我国年产微生物肥仅占化肥产量的0.5%。据专家测算，如果这一比例达到3%，就能减少50万吨化肥用量，增产粮食100亿公斤。 

我国是一个农业大国，作物种植面积广阔。农业是国民经济的基础，是“安天下的产业”。我国和世界大多数农业国家一样，目前均面临着因过量使用化肥、农药、激素而造成的环境污染、土壤酸化板结、地力衰退、农产品质量下降、有毒化学物质残留超标、危害人类健康等日趋严峻问题。尤其是食品安全、餐桌污染给人类带来的危害，已引起国际社会普遍关注。因此，发展生态农业，生产绿色食品，保障人民健康，倍受各国政府重视和支持。“绿色、环保、健康”已成为当今社会发展的主题。“解决21世纪农业问题，关键靠生物技术”，已成为世界各国专家、政要的共同认识。利用生物技术修复土壤、降解毒害、消除污染、促进植物和动物生长、增强防病抗逆能力、提高产量改善品质，其独特卓越的功效已为农业工作者所认识和接受。生物工程，被喻为“21世纪的朝阳产业”。应用生物技术研制的绿色食品生产资料和环保产品，具有巨大的市场需求和发展空间。我国微生物肥料的市场前景极为广阔。 

发明内容

本发明的目的在于利用微生物菌种和先进的生物技术研制侧孢芽孢杆菌制剂以及利用侧孢芽孢杆菌制剂制备微生物肥料。 

本发明是这样实现的： 

本发明的工艺流程路线如下：

1、侧孢芽孢杆菌制剂的制备：菌种（安瓿管）——试管斜面菌种培养——摇瓶菌种培养——种子罐深层液体发酵培养——封闭式固体发酵箱培养——侧孢芽孢杆菌制剂。

原料菌选育：    

通过对土壤中大量微生物的分离、筛选，将防病、促生长、抗逆性强的侧

孢芽孢杆菌（Bacillus   laterosporus）作为生产菌株之一，该菌株经中国疾病预防控制中心营养与食品安全所进行了菌种毒力试验，证实该菌株按食品经口毒性分级标准，属实际无毒物质。该菌株的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市海淀区中关村北一条13号，中国科学院微生物研究所)菌株保藏编号为：CGMCC NO.1755；

原料菌株侧孢芽孢杆菌的特性：

1、菌种选育形态学特性

形状及排列：菌体杆状，端稍细，单生成对、成堆；芽孢呈椭圆形，（1～

1.2）×（2.5～3）μm，附着于芽孢一侧有独木舟形体，芽孢在纺锤形孢囊中侧生、中生。

运动及鞭毛：能运动。 

2、生理特性 

（1）明胶穿刺培养：液化：阳性；液化速度：慢，弱。

（2）淀粉水解：阴性。 

（3）与氧的关系：有氧、无氧均能生长。 

（4）酪蛋白水解：阳性。 

（5）酪氨酸水解：阴性。 

（6）二羟丙酮的形成：阴性。 

3、培养学特性：培养时任选一种培养基培养  

  4、与温度的关系

培养基： J-肉汁；PH值：7.3~7.5

最高温度：47℃；

最适温度：30~40℃；

耐受温度：80℃，10分钟。

侧孢芽孢杆菌制剂的生产工艺 

经过不断的小试和中试，我们摸索出来一套行之有效的（液体发酵+固体

封闭式发酵）生产工艺方案：菌种（安瓿管）→斜面菌种培养→摇瓶菌种培养→种子罐深层液体发酵培养→封闭式固体发酵箱培养的工艺路线生产。项目生产首创性的采用先进的“深层液体发酵+封闭式固体发酵”的连续发酵工艺，自行研制了全封闭自控式固体发酵设备，使固体发酵的整个过程都处于全封闭的自动监控之下，对发酵过程中的培养基成分配方、温度、湿度、通气、PH值等环境条件，进行自动化检测、电子显示、自动控制，不仅大幅度提高产量，而且保证了产品质量的稳定性。