[发明专利]霉菌培养基

说明书

技术领域

本发明属于微生物工程技术领域，具体地说是涉及一种霉菌培养基。

背景技术

现有技术中，培养霉菌所使用的培养基通常都是马铃薯培养基（简称PDA培养基），该马铃薯培养基采用如下方法配制：取新鲜马铃薯，洗净去皮，按配制体积准备好切成小块的马铃薯，加水煮沸30min后用脱脂纱布过滤，在滤液中加入配制体积用量的蔗糖，按配制体积补足水分、分装入盛有配置体积量琼脂粉的斜面瓶内，经121℃～122℃灭菌30min，备用。该培养基存在如下问题：

1、对原材料要求高：

马铃薯必须是新鲜、带皮的。马铃薯去皮后因其细胞中的酚类物质在酚酶的作用下，与空气中的氧化合产生大量的醌类物质，使马铃薯迅速的变成褐色。用变了色的马铃薯做培养基，有以下不利因素：其一，因马铃薯外层的营养物质被分解使营养成分降低，而影响培养菌体的生长代谢；其二，变了色的马铃薯经煮沸后色泽变成了淡黄褐色，而影响霉菌菌菌丛的色泽、形态以及分生孢子的着色及形态。

2、配制步骤太繁琐：

去皮→切块→煮沸→过滤→混料→定容→灭菌。

3、PDA培养基质量不稳定：

1）PDA培养基质量受原材料马铃薯质量的影响：

经煮沸后易煮烂的马铃薯，其滤液色泽就深一些、表观略糊一些、其中所含的营养成分丰富一些；经煮沸后不易煮烂的马铃薯，其滤液色泽就淡一些、表观清亮一些、其中所含的营养成分就贫乏一些。

2）PDA培养基质量受马铃薯过滤介质、过滤方式的影响：

煮沸后的马铃薯经不同的过滤介质过滤，其滤液颜色、表观黏度、营养成分的含量均会不同。

煮沸后的马铃薯过滤时，采用静置沉降后过滤、煮沸后直接过滤或压榨式过滤，其所得滤液质量均存在差异。

4、在PDA培养基上菌体生长代谢速率不稳定：

因PDA培养基质量的不稳定，使得菌体所接种到的培养基质量存在差异，这会影响到菌体的生长代谢速率。

5、培养周期较长：

霉菌在PDA培养基上培养，生长周期一般都在5～7天。

发明内容

本发明的目的就在于针对现用PDA培养基的不足，提供一种取材方便、配制方便、简单易行、菌体生长较为同步、生长周期较短的霉菌培养基。

为此，本发明采用如下技术方案：

一种霉菌培养基，其特征在于其组成为：

所述马铃薯浸出粉在称量时要快速。

所述马铃薯浸出粉采用35～65℃纯化水边搅动边溶解。

本发明采用质量稳定的马铃薯浸出粉，并配合丰富菌体生长环境、方便菌体代谢观察的酵母浸出粉作为原料，获得的霉菌培养基质量稳定，且配料简单，取材方便，配制工艺简单易行，可操作性强，应用本发明的培养基进行霉菌培养，能够得到生长同步性好，菌层厚实、均匀，产孢子能力强的菌体细胞，并且可以缩短霉菌的培养周期，仅为3～5天。

具体实施方式

培养基配料→制备斜面→划线接种→恒温恒湿培养。

1培养基配制：

按照下述培养基组成配制培养基：

1.1马铃薯浸出粉称料注意事项：

因马铃薯浸粉外观性状为棕褐色、吸湿性较强的颗粒性粉末，所以，在称料时需做到：稳、准、静、快。

1.2马铃薯浸出粉的溶解注意事项：

因马铃薯浸粉具有较强的吸湿性，配料时倘若用热水溶解，会使得马铃薯浸出粉抱团而不易溶解，所以，要用3565℃纯化水来边搅动边溶解。

1.3马铃薯浸出粉添加比例的注意事项：

尽管马铃薯浸出粉可以提供菌体生长所需的碳源、氮源及部分微量元素，但，因马铃薯浸粉外观性状为棕褐色，配制后的溶液颜色亦呈棕褐色，这会对菌体形态特征的观察带来不便，为此，需要在参考溶液配制颜色的情况下，再添加适量的酵母膏，以丰富菌体生长环境、方便菌体代谢观察。

2接种：

选取生长势同步、斜面孢子丰厚、孢子色泽均一的霉菌斜面，用接种环挑取1环划线接种于斜面培养基上，倒置于恒温培养室内，温度33～35℃、相对湿度60～70%，培养3～5天。

3培养观察：

3.1斜面培养比对生长状态观察：（表1）

表1:

比对观察：

PDA培养基：