[发明专利]一种作为断乳仔猪饲料添加剂的表达乳铁蛋白重组乳酸菌组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种作为断乳仔猪饲料添加剂的表达乳铁蛋白重组乳酸菌组合物，可作为活菌制剂直接添加到仔猪日粮中，进而提高仔猪生长性能，免疫功能和肠道微生态健康，属于基因工程和饲料科学领域。 

背景技术

断奶时期在猪的整个生长周期中是一个非常具有挑战性且影响重大的时期，断乳仔猪饲养中由于环境和营养条件的变化，使仔猪的肠道内正常菌群遭受破坏，加上断奶后胃肠消化酶减少，活性不足，影响对饲料的消化，引起消化不良性腹泻；仔猪由于免疫系统发育不完善，对抗原刺激反应很弱，不能积极地产生主动免疫，只能从母乳中获得被动免疫，断乳后，会造成免疫机能下降，另外仔猪的神经调节机能弱，在断奶、更换饲料、变换环境等应激状态下会诱发一系列的断乳应激综合症，甚至造成死亡。改善饲料品质是减少断乳应激的主要防治措施。日粮品质的改善主要体现在基本营养成份的改善和添加剂的使用两方面： 

饲料基本营养成分的改变主要考虑日粮中蛋白质的消化率、适口性、氨基酸平衡和是否有免疫保护等，以及应用一些优质原料，提高断乳仔猪日粮的可消化性，降低其抗原性。为提高早期断乳仔猪的采食量，弥补消化酶和胃酸的不足，目前国内外在早期断乳日粮中普遍使用的添加剂主要有酸化剂、调味剂、酶制剂等。近年来提出的益生素的研究引起越来越多人的关注，其作为一种活菌制剂通过在肠道内的大量繁殖来调节肠道菌群的平衡，并在代谢过程中产生有机酸、酶、氨基酸及一些生长因子来增强动物的抗病力。 

乳铁蛋白(Lactoferrin，LF)是一种天然活性铁结合糖蛋白，广泛存在于动物的乳汁(初乳)、血液、唾液、小肠液等外分泌液或血浆、中性粒细胞中。其中除乳腺组织中含量丰富外，其他组织中均含量甚微。LF能够调节机体对铁的需求，影响肠黏膜对铁的吸收，从而达到机体内铁离子的平衡。动物机体内转运铁离子的蛋白有运铁蛋白和乳铁蛋白，都具有运输铁的功能，由于运铁蛋白在极酸性的胃环境内 不能正常发挥其运送铁的能力，而乳铁蛋白能够抵抗胃酸，仍然能保持自身生理功能，因此乳铁蛋白才能在动物肠道内运送铁离子。当LF运送到达肠道后，与肠黏膜细胞表面的特异性受体细胞结合，再由这些受体细胞运送铁离子进入细胞内部，然后乳铁蛋白-R进入细胞内部，释放铁离子，从而达到增强机体对铁的吸收作用，它能使吸收率提高5～7倍。另外，现已经确定LF广谱的抗菌和抗病毒活性，对革兰氏阴性菌和阳性菌均有抑制作用，针对需铁的革兰氏阴性菌，如大肠菌群、沙门氏菌等；可抑制的革兰氏阳性菌有金黄色葡萄球菌、单细胞李斯特菌等，但基本不抑制对铁需求不高的细菌,如乳酸菌。在抗病毒方面，对牛LF研究成果较显著，研究比较多的如单纯疱疹病毒、丙肝病毒、人免疫缺陷性病毒、人巨细胞病毒、人乳头瘤病毒及猫科动物免疫缺陷性病毒都有很强的抑制作用。LF还是一种天然的机体免疫调节剂。LF能够发挥其特异的调节功能，主要是与其靶细胞表面的特异性受体结合的能力，机体释放出的LF能够与致病菌细胞膜表面的受体结合，并导致病菌的死亡，从而发挥免疫调节的功能，同时还能够调节机体细胞因子的水平，促进抗体的生成，诱导机体体液免疫应答，促进B细胞和T细胞的成熟和淋巴细胞增生，从而减轻炎症反应。LF还有促进中性白细胞向受伤部位的吸附和聚集、增加粒细胞黏性、调节免疫球蛋白分泌、参与调节机体免疫耐受能力、促进细胞间相互作用、抑制补体系统激活或激活已有的补体途径等功能。断乳后乳铁蛋白的补充可提高早期断奶仔猪生产性能、促进肠黏膜发育、改善肠道微生物菌群、增强肠道黏膜分泌型免疫球蛋白A和肠道细胞因子的产生，但由于乳铁蛋白来源有限，大肠杆菌及酵母菌的体外表达，纯化成本高，难以在生产中推广应用；如果以益生性乳酸菌进行分泌表达，通过发酵罐大量培养后以活菌制剂的形式，无需纯化，可直接作为饲料添加剂饲喂仔猪，既可以抑制断乳应激的产生，又可以替代抗生素在饲料生产中进行应用，为健康环保的绿色添加剂。