[发明专利]一种蜡状芽孢杆菌及其应用无效

专利信息
申请号: 201310595681.6 申请日: 2013-11-25
公开(公告)号: CN103805533A 公开(公告)日: 2014-05-21
发明(设计)人: 孙庆元;张雪崧 申请(专利权)人: 豆食代(大连)农业科技有限公司
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;A01P21/00;C12R1/085
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地址: 116400 辽*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要:
搜索关键词: 一种 芽孢 杆菌 及其 应用
【说明书】:

技术领域

发明涉及一种蜡状芽孢杆菌及其应用,具体地说,涉及一种蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)QD5,所述蜡状芽孢杆菌QD5可促进豆芽生长,属于促生菌生物技术领域。 

背景技术

细菌不但可以与植物在体内共生,也可以在体外共生。体内共生关系最常见的例子就是豆科植物与固氮菌形成的根瘤。体外共生关系主要是指植物根际菌,是植物根系与土壤之间的界面中的细菌和真菌。根际细菌对调节植物根系从土壤中吸收养分和通过分泌植物生长调节素调节植物的生长起着至关重要的作用。国内外报道较多的是假单胞杆菌(Pseudomonas)、芽孢杆菌(Bacillus)、布克霍尔德氏菌(Burkholderia)在植物根际具有抗病促生作用,所述菌类对作物生长促进或抑制取决于作物本身的性质以及细菌的种类和数量。 

豆芽是市民菜篮子中一个很重要的品种,由于其发育过程主要靠种子自身贮藏的营养物质,不需要补充吸收矿物质营养和进行光合作用,是一种简便的无土栽培形式,可就地取材,不受时间、地点的限制,一年四季均可栽培,时间短、周转快,维生素丰富,对调节蔬菜淡季供应起着重要作用。为了提高豆芽的生产量,缩短生产周期,同时抑制在生产过程中豆芽腐烂病菌的生长繁殖,在不施用任何农药、化肥、添加剂的条件下,施用促生菌是有效的技术手段之一。在国内外从植物根际分离筛选很多微生物并作为菌肥已经广泛应用于农业生产,但是,利用促生菌促进豆芽生长还未见报道。 

在我国,食品安全已成为千家万户关注的问题。食品安全不仅直接关系人民群众的身体健康和生命安全,而且还影响经济和社会的稳定,随着社会的发展,食品本身也蕴含了人类的进步和文明。豆芽是人们最为喜欢的蔬菜品种之一。利用促生菌生产豆芽不仅可向市场提供无毒有机的豆芽,而且促生菌可提高豆芽的产量、缩短生产周期,提高生产效率,具有良好的经济和社会效益。 

发明内容

针对现有技术中尚无一种蜡状芽孢杆菌作为促进豆芽生长的促生菌的缺陷,本发明的目的之一在于提供一种蜡状芽孢杆菌QD5,本发明的目的之二在于提供一种蜡状芽孢杆菌QD5作为豆芽促生菌的应用。 

本发明的目的是通过以下技术方案实现的。 

一种蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)QD5(以下简称QD5菌株),所述QD5菌株是通过对大豆、绿豆、花生和苜蓿的幼苗根际土壤样品进行筛选、驯化选育获得的;所述QD5菌株于2013年10月10日,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCG),保藏编号为CGMCC No.8316。 

QD5菌株具有下述特征与性质: 

(1)形态特征及生理生化性质 

在LB琼脂平板培养基上,37℃,培养24h,形成圆形或近似圆形、质地软、无色素、稍有光泽的白色菌落(似蜡烛样色),直径5mm~7mm。在显微镜下,呈杆状,芽孢圆形,中端或次端生,包囊无明显膨大。菌体细胞杆状,末端方,成短或长链,1.0~1.2×3.0~5.0μm。革兰氏阳性,无荚膜,运动。菌落大,表面粗糙,扁平,不规则。 

(2)分子生物学鉴定 

利用16S rDNA的通用引物Seq forward(5′-GAGCGGATAACAATTTCACACAGG-3′)、Seq reverse(5′-CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC-3′)和Seq internal(5′-CAGCAGCCGCGGTAATAC-3′),以QD5菌株的基因组DNA作为模板进行PCR扩增,得到PCR产物,回收,测序,得到QD5菌株的16S rDNA基因全序列,见序列表SEQ ID No.1;所述序列通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)的BLAST检索程序系统进行序列同源性分析,发现与芽胞杆菌属(Bacillus)的蜡状芽胞杆菌(Bacillus cereus)的ITS(internal transcribed spacers)序列99%同源,如表1所示,与已知蜡状芽胞杆菌至少存在1%的非同源性差异,说明所述QD5菌株为新菌株。 

表1 QD5菌株与已知菌株的ITS序列的最大同源性 

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