[发明专利]血清中甘油三酯的甘油脱氢酶测定方法无效
申请号: | 201310601425.3 | 申请日: | 2013-11-20 |
公开(公告)号: | CN103602718A | 公开(公告)日: | 2014-02-26 |
发明(设计)人: | 李立和;张超;白会仓;丁弘;郭秋红 | 申请(专利权)人: | 天津市宝坻区人民医院 |
主分类号: | C12Q1/44 | 分类号: | C12Q1/44;C12Q1/32 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 301800*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 血清 甘油 脱氢酶 测定 方法 | ||
1.一种血清中甘油三酯的甘油脱氢酶测定方法,其特征在于甘油脱氢酶及NAD+同在试剂I中,试剂II仅含有脂蛋白脂肪酶有效成分;其测定方法为:血清先与试剂I于37℃温浴3~5分钟,血清中游离甘油与试剂I的反应生成NADH,加入试剂II后于37℃温浴4~7分钟,甘油三酯水解后经反应也生成NADH,仪器在334~340nm波长处检测,以试剂I反应产生的NADH为空白,由试剂II反应产生的NADH计算出甘油三酯的含量,计算公式为:
ODTG=OD2-OD1×[(SV+R1V1)/(SV+R1V1+R2V2)]
甘油三酯浓度=F×ODTG
其中ODTG是甘油三酯产生的吸光度,OD1是样品加入试剂I反应后测得的吸光度,OD2是样品加入试剂II反应后测得的吸光度,SV是血清的体积,R1V1是试剂I的体积,R2V2是试剂II的体积,F是校正因数。
2.根据权利要求1所述的血清中甘油三酯的甘油脱氢酶测定方法,其特征在于试剂I中含有甘油脱氢酶及NAD+。
3.根据权利要求1所述的血清中甘油三酯的甘油脱氢酶测定方法,其特征在于试剂I中每升碳酸盐缓冲液溶解碳酸钾100~300mmol,碳酸氢钠100~300mmol,NAD+5~15mmol,甘油脱氢酶40000~50000U,Proclin-300防腐剂100μl~300μl;试剂II中每升碳酸盐缓冲液溶解碳酸钾100~300mmol,碳酸氢钠100~300mmol,溶解脂蛋白脂肪酶1800~2100U,Triton X-100 0.08g~0.16g,Proclin-300防腐剂100μl~300μl。
4.根据权利要求3所述的血清中甘油三酯的甘油脱氢酶测定方法,其特征在于试剂I和试剂II中碳酸盐缓冲液的pH值为10.5~11.5。
5.根据权利要求3所述的血清中甘油三酯的甘油脱氢酶测定方法,其特征在于测定的体积比为:样品∶试剂I∶试剂II=1∶70~80∶20~30。
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