[发明专利]源于脆皮大头蛙的抗氧化肽及其基因和应用

说明书

技术领域

本发明涉及源于脆皮大头蛙的抗氧化肽及其基因和应用，属于生物医学技术领域。

背景技术

机体氧化反应产生的自由基(free radical)是含有一不成对电子的原子团，如超氧阴离子、羟自由基等。自由基具有强氧化性，随着年龄增长或在病理状态下，自由基产生过多若不能被及时清除，就会在细胞内堆积，与机体内的生物大分子，如蛋白质、核酸、脂质等相互作用，生成过多的氧化物和过氧化物，最终影响机体新陈代谢，并对机体产生不可逆的损伤。衰老及很多慢性疾病如癌症、心血管疾病、肺气肿、肝硬化、关节炎等都和自由基的损伤有关。尽管机体存在抗氧化防御系统，但其并不能完全有效地抵御或修复氧化作用带来的损伤。如何适当的清除自由基，使其在体内维持在一个较低的水平，从而延缓机体衰老，是当前一个重要的研究课题。

近年来抗氧化物在化妆品领域的应用中兴起,尤其是天然抗氧化物。由于皮肤的光老化作用是由于紫外线诱导皮肤细胞产生大量的氧自由基堆积而造成的。现在许多护肤品中加入抗氧化剂, 有减少雀斑、防辐射、延缓衰老、调节免疫和提高皮肤自我保护的作用。

此外食品中营养成分的氧化反应会产生过氧化物。过氧化物影响食品的营养价值，甚至可导致疾病发生，寻找安全的抗氧化剂以抑制过氧化物产生一直是生化营养学的研究热点。目前广泛使用的抗氧化剂多为化学合成物，如BHA、BHT等，虽抗氧化效果良好，但对人体肝、脾、肺有蓄积性致癌作用。因此人们逐渐把目光转向天然抗氧化剂。

为了抵抗活性氧自由基对机体的损害，在漫长的进化过程中生物体形成多种不同的自由基清除系统，包括非基因编码的小分子物质，如尿酸、维生素C和辅酶Q等；基因编码的大分子抗氧化酶类，如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶和谷胱甘肽酶系统；基因编码的小分子抗氧化肽类，如从两栖类蛙科动物皮肤中发现的各种小分子抗氧化多肽。蛙类皮肤提取的小分子多肽，热稳定性强、水溶性好、无毒无副作用，可被人体内的酶系降解、消化，减少热处理时间，最大条件保持食品的营养价值，在食品中作为抗氧化剂；在医药中制备抗氧化药物；在护肤品种作为添加剂，具有很好的应用前景。

脆皮大头蛙属于两栖纲无尾目蛙科大头蛙属，为中国特有种，仅分布于海南省。目前关于脆皮大头蛙来源抗氧化多肽的研究还没有报道。。

发明内容

本发明的目的在于提供三种脆皮大头蛙抗氧化肽Fragilin-A1、Fragilin-B2、Odorranain-Q-Lf及其编码基因与应用。

本发明采用的技术方案为：源于脆皮大头蛙的抗氧化肽及其基因和应用，抗氧化肽Fragilin-A1、Fragilin-B2和Odorranain-Q-Lf；所述抗氧化肽Fragilin-A1为直链多肽，分子量为1720.95Da，等电点是8.04，含有15个氨基酸残基，全序列的一级结构为：Val-Lys-Arg-Arg-Gly-Gln-Asp-Cys-Ile-His-Gly-Phe-Cys-Ser-Asp；所述抗氧化肽Fragilin-B2为直链多肽，分子量为1464.66Da，等电点是8.75，含有12个氨基酸残基，全序列的一级结构为： GLy-Gln-Phe-Asn-Asp-Lys-Arg-Trp-Ile-Pro-Phe-Gly；抗氧化肽Odorranain-Q-Lf为直链多肽，分子量为2597.18Da，等电点是9.53，含有21个氨基酸残基，全序列的一级结构为：Ala-Pro-Ile-Arg-Met-Trp-Tyr-Met-Tyr-Arg-Lys-Leu-THr-Asp-Met-Glu-Pro-Lys-Pro-Val-Ala。

    所述抗氧化肽Fragilin-A1前体的基因由690个核苷酸组成，自5’端至3’端序列为: 

atgttcacct tgaagaaatc cctgttcctg gttctctttc tggggattgt 50

ctccttagct ctctccaagg cagagagcga cgctgatgac ggaaccagct 100

atggtcctgc agaggagaag agaacagccg ggaatgagga ggacagagag 150

caaagaaggg tgaaaaggag aggacaagat tgtatacatg gtttttgttc 200

ggattgagtt ggaagtcatc taatgttcag tatcatttgg taaaatgctg 250