[发明专利]一种酶促丝素蛋白膜固定化过氧化氢酶的方法

权利要求书

1.一种酶促法丝素蛋白膜固定化过氧化氢酶的方法，其特征是利用酪氨酸酶催化氧化丝素蛋白与过氧化氢酶交联，在实现丝素蛋白表面固定化过氧化氢酶的同时，改善了丝素蛋白膜材料的力学性能。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于具体步骤如下：

(1)丝素蛋白溶液的制备：以溴化锂或氯化钙溶解丝素纤维，制备丝素溶液，处理工艺处方及条件：将脱胶后家蚕丝加入到溴化锂或氯化钙的水溶液(乙醇溶液)体系中，在50～80℃左右不断搅拌至溶解(浴比1：5～100)，得到混合丝素溶液。将丝素溶液装入透析袋，以去离子水中透析24～48小时，期间每小时换1次水，透析后过滤，制得丝素水溶液。

(2)丝素蛋白膜的制备：取定量的丝素溶液倒入低界面张力的成膜器皿(如聚四氟乙烯，PTFE)中，通过延流使其平整铺展，在15～85℃条件下干燥1～36小时得到丝素蛋白膜；也可以先将丝素溶液进行冷冻，然后在-50～-20℃条件下采用真空干燥的方式成膜。

(3)酶促丝素蛋白接枝过氧化氢酶：将丝素蛋白膜浸渍在酪氨酸酶和过氧化氢酶的溶液中进行酶促接枝反应，处理工艺处方及条件：酪氨酸酶用量为1～200U/g丝素蛋白，过氧化氢酶1～200U/g丝素蛋白，温度20～40℃，pH范围6.0～8.0，处理1～24小时。

(4)水洗后处理：酪氨酸酶处理结束后，室温下以去离子水进行丝素蛋白膜水洗，去除丝素蛋白膜表面游离的酪氨酸酶和过氧化氢酶，低温烘干后完成载酶丝素蛋白膜的制备。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述丝素溶液制备时可选用不同浓度的溴化锂溶液、溴化锂-乙醇水溶液或氯化钙-乙醇水溶液。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于应用的酪氨酸酶和过氧化氢酶包括了动物、植物和微生物等不同来源的酶品种。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于丝素蛋白膜改性中酪氨酸酶和过氧化氢酶既可以先后分步添加至反应体系中，也可采用同时添加的方法进行。