[发明专利]制备食蟹猴动物模型的饲料

说明书

技术领域

本发明属于动物饲料领域，具体涉及一种能够制备食蟹猴肝硬化动物模型的饲料。

背景技术

食蟹猴生命周期长，生物学特性与人类极其相似，是研究人类慢性疾病的最佳实验材料，用它建立的人类疾病动物模型有利于观察疾病及其并发症的发生发展规律，同时为治疗药物的疗效检验和安全性评估提供可靠的保证，已逐渐成为科学研究和药物研究中使用较多的一种灵长类实验动物。

为了深入研究肝硬化的发病机制及筛选有效预防和治疗本病的药物，选择科学性、实用性、重现性的肝硬化动物模型有着十分重要的意义。由于各种动物之间的差异以及饮食习性的问题，各物种的肝损伤模型复制有较大难度。目前，虽有用高脂饲料诱导老鼠肝硬化的报道，但未见有诱导食蟹猴肝硬化的报道。

发明内容

本发明公开了一种可用于制备食蟹猴肝硬化动物模型的饲料及其制备方法。

本发明通过如下方案实现：

将常规饲料与鸡蛋黄粉混合，加入液态猪油中搅拌均匀，得A；再将葡萄糖、一水硫酸镁和脱氧胆酸钠用热水溶解得B；将A与B混合，搅拌均匀，60℃烘烤成稠状，制成固体形状，干燥，即得。其中按质量比含8％-15％猪油、5％-10％鸡蛋淡黄粉、1％-2％一水硫酸镁、1％-2％脱氧胆酸钠、3％-8％D-葡萄糖，其余为常规饲料。

本发明提供的用于制备食蟹猴肝硬化动物模型的饲料，成本低廉，使用方便，造模成功率高，为食蟹猴肝硬化动物模型的制备提供了一个简便的方法。具有良好的应用前景；因食蟹猴与人类基因有高度相似，通过其肝硬化的模型来研究肝病的发生机制，评价、筛选相关药物有着重要的意义。

附图说明：

附图1为肝硬化组织超声图

附图2为对照组B超影像

图3为(200×)，VG染色，汇管区附近和增生的小胆管周围出现胶原纤维

图4为(200×)，VG染色，正常肝脏活检组织

具体实施方式

实施例1

将8.2kg常规饲料与0.5kg鸡蛋黄粉混合，加入0.8kg液态猪油中搅拌均匀，得A；再将0.3kg葡萄糖、0.1kg一水硫酸镁和0.1kg脱氧胆酸钠用70℃水(5L)溶解得B；将A与B混合，搅拌均匀，60℃烘烤成稠状，制成固体形状，干燥，即得。

实施例2

将7.2kg常规饲料与0.8kg鸡蛋黄粉混合，加入1.2kg液态猪油中搅拌均匀，得A；再将0.6kg葡萄糖、0.1kg一水硫酸镁和0.1kg脱氧胆酸钠用70℃水(3L)溶解得B；将A与B混合，搅拌均匀，60℃烘烤成稠状，制成固体形状，干燥，即得。

实施例3

将6.3kg常规饲料与1kg鸡蛋黄粉混合，加入1.5kg液态猪油中搅拌均匀，得A；再将0.8kg葡萄糖、0.2kg一水硫酸镁和0.2kg脱氧胆酸钠用70℃水(3L)溶解得B；将A与B混合，搅拌均匀，60℃烘烤成稠状，制成固体形状，干燥，即得。

一.食蟹猴肝硬化动物模型的建立

选取4-7岁食蟹猴雌、雄各12只，雄性8～10kg，雌性5～7kg，供给本发明饲料。

空白对照组4-7岁，雌、雄各3只，雄性8～10kg，雌性5～7kg，供给普通商业饲料。

二.食蟹猴肝纤维化诊断模式评价方法及结果

该方法包括血清生化标志物、影像学、病理组织学诊断。

1.血清生化标志物主要包括血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)。

造模8-10周开始，造模组肝细胞大量坏死，肝功能显著改变，其中对照组和造模组肝功能变化如下：

2.B超检查

用氯胺酮10mg／kg静脉麻醉，M7便携式超声仪，采用高频腹部探头对肝脏扫描，造模34周时，80％动物肝脏B超检查肝脏回声增强。

对照组B超影像(见图2)，肝脏光点均匀光滑，肝内管道系统走行正常，纹理清楚，透声良好。

造模组B超影像(见图1)，肝脏光点增粗，表面不规则，崎岖不平，肝脏实质不均匀。

3.病理组织学分析

氯胺酮10mg／kg肌肉麻醉后，B超诱导行活检肝组织，10％中性福尔马林固定，石蜡包埋、4um切片，制备肝组织学切片，VG染色，采用奥林巴斯显微镜观察肝细胞脂肪变性与胶原纤维化增生情况，并拍镜下照片。

造模34周时，活检显示汇管区附近和增生的小胆管周围出现胶原纤维(见图3)对照组(见图4)。