[发明专利]一种DHA磷脂的使用方法

说明书

技术领域

本发明属于天然高分子领域，具体涉及一种含DHA的磷脂在制备用于延长睡眠时间的保健食品、功能性食品或药物中的应用。

背景技术

现代社会竞争激烈，人们思想压力大，致使许多人长期失眠或睡眠质量不高。长期失眠会使人患上许多相关疾病。到目前为止，治疗失眠改善睡眠的药物其效果褒贬不一，许多人使用安眠药来缓解失眠或睡眠质量问题，长时间服用安眠药会产生药物依赖性并且可能导致其他疾病发生。安眠药物产生的毒副作用也严重危害人体健康。因此，有必要获得副作用更小的，具有延长睡眠时间的物质。 

发明内容

本发明的目的是提供一种DHA磷脂的新的用途，即其在制备用于辅助睡眠的制品中的应用，从而弥补现有技术上的不足。 

本发明首先提供DHA磷脂的新的用途，即其在制备用于辅助睡眠的制品中的应用。 

本发明所述的DHA磷脂，其一种制备方法如下：首先用提取液浸提原料，静置分层后，收集下层溶液，用无水硫酸钠除水后蒸干得到总脂，加入冷丙酮洗涤后等到粗产品，粗产品经纯化后得到DHA磷脂。 

其中提取液为氯仿、甲醇和0.88% KCl溶液的混合液，其中氯仿、甲醇和KCl溶液的体积比为 60：30：22.5; 

所述的纯化为硅胶柱层析法纯化；

所述的原料为鱿鱼卵粉或南极磷虾粉。

所述的辅助睡眠的制品，为食品、保健品或药品。 

本发明所述DHA磷脂纯天然提取物，安全性高，稳定性好，更易被人体吸收，具有很高营养价值和保健功能。对于小鼠的使用效果表明，可以有效的促进小鼠的睡眠时间；因此，具有开发成辅助睡眠的制品的应用潜力。 

具体实施方式

DHA磷脂是一种富含二十二碳六烯酸（DHA）的磷脂，主要存在于海洋生物体内，尤其以海洋动物的卵中含量较为丰富。申请人在长期的研究中发现，DHA磷脂能够有效的延长小鼠睡眠时间的问题，从而促成了本发明。 

在本发明中，为了提供使用效果，优选DHA含量不小于15%的DHA磷脂。 

实施例1  鱿鱼卵DHA磷脂的制备 

称取10g的鱿鱼卵粉,先加入体积比60∶30∶22.5 加入氯仿,甲醇和KCl溶液（质量体积百分比浓度为0.88%）共1125mL，振荡摇匀后静置12h分层。收集下层氯仿层，用无水硫酸钠过滤，收集滤液蒸干得到总脂。用冷丙酮洗涤3-4次获得磷脂。再经硅胶柱层析法纯化，具体方法是称取45g柱层析硅胶，先后分别用150mL甲醇和150mL氯仿充分搅拌静置30min，风干后，在105℃下活化1-2h，冷却至室温。将100mL氯仿加入到活化后的硅胶搅拌均匀至没有气泡，然后倒入层析柱中静置30min待胶柱稳定后进行实验。纯化时使用甲醇洗脱，将收集到的溶液旋蒸至干，得到所需DHA磷脂。

所得DHA磷脂样品利用高效液相色谱仪测得其中磷脂酰胆碱（PC）的含量为92.1%，利用气相色谱仪对其脂肪酸进行分析, 测得其中DHA 含量为40%。 

实施例2  南极磷虾DHA磷脂的制备 

称取10g南极磷虾粉，采用8倍体积的95%乙醇800mL进行萃取，在30℃下搅拌6h，混合物用真空布氏漏斗过滤，滤液在45℃下旋转蒸发蒸去溶剂，真空干燥至恒重得到总脂。用冷丙酮洗涤数次获得磷脂。磷脂经硅胶柱层析法纯化后，得到所需的DHA磷脂。

所得DHA磷脂样品利用高效液相色谱仪测得其中磷脂酰胆碱（PC）的含量为85.3%，利用气相色谱仪对其脂肪酸进行分析, 测得其中DHA 含量为15%。 

实施例3  鱿鱼卵DHA磷脂对小鼠睡眠时间的影响 

1 材料与方法

1.1 实验分组

DHA磷脂的制备方案与实施例1相同，选用昆明种小鼠，体重为18~22 g，分为10组，分别为DHA-甘油三酯组、不含DHA的磷脂组、DHA磷脂组和对照组，每组8只。根据DHA磷脂及卵磷脂的人体推荐用量，DHA-甘油三酯组剂量设为100mg/kg BW（标准体重）和不含DHA的磷脂组剂量设为200mg/kg BW（标准体重），DHA磷脂组剂量设为150mg/kg BW，对照组给予以等体积的蒸馏水。分别给予相应剂量组动物灌胃，灌胃体积为0.2 mL/10g BW，每天灌胃一次，连续灌胃30 d。

1.2实验方法