[发明专利]新的肿瘤血清标志物及其应用

权利要求书

1.POTE蛋白的自身抗体在作为肿瘤血清标志物中的应用。

2.检测POTE蛋白的自身抗体的试剂在制备用于癌症的检测、辅助诊断和/或预后判断的组合物中的应用；

优选地，所述检测POTE蛋白的自身抗体的试剂包括：与POTE蛋白的自身抗体特异性结合的重组POTE蛋白或POTEE多肽片段，或用于在PCR中合成编码所述POTE蛋白或POTE多肽片段的基因DNA链和/或其cDNA链的PCR引物，或编码所述POTE蛋白或POTE多肽片段的基因序列或包含该基因序列的表达载体。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其中，所述癌症为乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、食管癌、鼻咽癌、胃癌、结直肠癌、阑尾粘液腺癌、喉癌、肺神经内分泌癌、肝癌、胰腺癌或非霍基金式淋巴瘤。

4.根据权利要求2所述的应用，其中，

所述与POTE蛋白自身抗体特异性结合的POTE多肽片段包括：

(a)由SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示的氨基酸序列组成的多肽片段；或

(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且与(a)具有相同功能的由(a)衍生的多肽片段；

更优选地，所述与POTE蛋白自身抗体特异性结合的POTE多肽片段还可进一步包括：由SEQ ID No.6所示的氨基酸序列组成的多肽片段，和/或由SEQ ID No.8所示的氨基酸序列组成的多肽片段；或进一步包括与SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.6或SEQ ID No.8高度同源的来自POTE-A、POTE-B、POTE-C、POTE-D、POTE-F、POTE-G、POTE-H、POTE-I、POTE-J、POTE-M的多肽片段；

所述与POTE蛋白自身抗体特异性结合的重组POTE蛋白为：

(c)由SEQ ID No.5所示的氨基酸序列组成的融合蛋白；或

(d)在(c)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且与(c)具有相同功能的由(c)衍生的蛋白；

更优选地，所述与POTE蛋白自身抗体特异性结合的重组POTE蛋白还可进一步包括：

由SEQ ID No.7所示的氨基酸序列组成的融合蛋白，和/或由SEQ ID No.9所示的氨基酸序列组成的融合蛋白。

5.一种检测POTE蛋白的自身抗体的试剂，该试剂包括：与POTE蛋白的自身抗体特异性结合的重组POTE蛋白或POTE多肽片段，或用于在PCR中合成编码所述POTE蛋白或POTE多肽片段的基因DNA链和/或其cDNA链的PCR引物；

优选地，所述与POTE蛋白自身抗体特异性结合的POTE多肽片段为：

(a)由SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示的氨基酸序列组成的多肽片段；或

(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且与(a)具有相同功能的由(a)衍生的多肽片段；

所述与POTE蛋白自身抗体特异性结合的重组POTE蛋白为：

(c)由SEQ ID No.5所示的氨基酸序列组成的融合蛋白；或

(d)在(c)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且与(c)具有相同功能的由(c)衍生的蛋白。

6.一种检测POTE蛋白的自身抗体的方法，该方法包括：

利用检测POTE蛋白的自身抗体的试剂，采用ELISA方法、DOT BLOT方法、WESTERN BLOT方法和/或免疫荧光方法检测血清样品中POTE自身抗体的存在。

7.一种富集纯化POTE蛋白的自身抗体的方法，该方法包括：

制备固相化亲和层析柱：采用Thermo的固化二氨基二丙基氨琼脂糖与POTE多肽片段分别混匀，并加入EDC偶联剂偶联；

利用以上层析柱对肿瘤患者血清进行亲和层析，获取POTE蛋白的自身抗体。