[发明专利]一种板蓝根精制多糖的制备方法有效
申请号: | 201310613139.9 | 申请日: | 2013-11-27 |
公开(公告)号: | CN103694363A | 公开(公告)日: | 2014-04-02 |
发明(设计)人: | 吕竹芬;陈燕忠;谢清春;冯思欣 | 申请(专利权)人: | 广东药学院 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 广州市越秀区海心联合专利代理事务所(普通合伙) 44295 | 代理人: | 黄为 |
地址: | 510006 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 板蓝根 精制 多糖 制备 方法 | ||
技术领域
本发明公开一种多糖的制备方法,具体的说是,一种板蓝根精制多糖的制备方法。
背景技术
板蓝根多糖具有抗病毒作用,对非特异性免疫和体液免疫均有一定的增强作用。其粗多糖提取物含有大量蛋白质、色素等杂质,对多糖产品的纯度和药效都有较大影响,尤其是要将其开发成纯度较高的药品时,除去粗多糖中所含的蛋白和色素是一个必不可少的纯化步骤。
传统的多糖脱蛋白方法有Seavag法、三氯乙酸法、HCl法、酶法等,其中Seavag法最为常用,Seavag法是三氯乙酸和正丁醇按一定比例混合对多糖液进行萃取,重复数次,直至脱尽蛋白。使用该法不仅多糖损失量大,产品中的有机溶剂难以除净;而且有机溶剂使用量大,成本高、污染环境。多糖脱色方法有活性炭吸附化、大孔树脂吸附法、氧化法等。采用以上方法,通常脱色效率不高,或会对多糖造成一定损失、破坏。传统工艺中,脱蛋白与脱色常分两步完成,工艺复杂,耗时长。
发明内容
针对上述问题,本发明的目的在于提供一种操作简单,蛋白脱除率高,多糖损失量小,环境友好的板蓝根精制多糖的制备方法。
为解决上述技术问题,本法提供的技术方案是这样的:该板蓝根精制多糖的制备方法,其特征在于,依次包括下述步骤:
1)提取板蓝根水提物,浓缩后醇沉,再过滤,复溶,得到板蓝根多糖液;
2)将步骤1)得到的板蓝根多糖液采用离子交换树脂吸附纯化,制得板蓝根精制多糖。
上述的板蓝根精制多糖的制备方法,步骤1)所述的板蓝根多糖液按生药计含量为0.02~1g/mL。
上述的板蓝根精制多糖的制备方法,步骤1)所述的板蓝根多糖液的pH值为1~12;所述的pH值采用1mol/L NaOH溶液或1mol/L HCl溶液调节。
上述的板蓝根精制多糖的制备方法,步骤2)所述的离子交换树脂为大孔型弱酸阳离子交换树脂。
上述的板蓝根精制多糖的制备方法,所述的大孔型弱酸阳离子交换树脂的母体为聚丙烯酸,功能基团为羧基。
上述的板蓝根精制多糖的制备方法,步骤2)所述的离子交换树脂吸附时间为1~5h;吸附温度为25~50℃。
本发明提供的技术方案,依据板蓝根多糖一般呈中性而蛋白带电的性质,利用离子交换树脂能吸附相反电荷的分子,大孔树脂吸附小分子的特性,实现板蓝根粗多糖的脱蛋白和脱色。
该方法具有操作简单,蛋白脱除率高,多糖损失量小等优点,并且在操作过程无需降低多糖液浓度,减少了后续操作与成本;并且在操作过程未使用有毒的有机溶剂,避免了有机溶剂残留的危害,减少了环境污染;并且所采用的树脂为可再生树脂,可以重复使用,降低了生产成本,有利于工业生产应用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明,但本发明的保护范围并不限于此。
实施例1
1)称取板蓝根20g,加入300mL去离子水,90℃温浸提取,提取2次,每次2h;合并2次提取液,减压浓缩至100mL,加入280mL乙醇,使乙醇浓度为70%。静置10h,滤纸过滤得到醇沉物,用200mL乙醇洗涤,加入400mL去离子水,超声复溶,减压浓缩至60mL,滤去不溶物,即得浓度约0.33g/mL(按生药计)板蓝根多糖液。
2)预处理的大孔型弱酸阳离子交换树脂
用1mol/L盐酸溶液以2~3倍柱体积的洗脱2小时,去离子水冲洗柱子至接近中性;然后再用1mol/L NaOH溶液以2~3倍柱体积的洗脱2小时,去离子水冲洗柱子至接近中性;最后用1mol/L盐酸溶液以2~3倍柱体积的洗脱2小时,去离子水冲洗柱子至接近中性,具体参数见表1。
本发明所述的大孔型弱酸阳离子交换树脂可以再生,在方法为,采用1mol/L盐酸溶液以2~3倍柱体积的洗脱2小时,去离子水冲洗柱子至接近中性;然后再用1mol/L NaOH溶液以2~3倍柱体积的洗脱2小时,去离子水冲洗柱子至接近中性;最后用1mol/L盐酸溶液以2~3倍柱体积的洗脱2小时,去离子水冲洗柱子至接近中性。
表1离子交换树脂产品说明
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