[发明专利]一种细菌Bacillus subtilis BCF-6及其制备的生物制剂与应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物农药领域，更具体地，涉及一种细菌Bacillus subtilis BCF-6及其制备的生物制剂与应用。 

背景技术

国兰（Cymbidium spp.）在我国具有悠久的栽培历史，主要分布于广东、福建、台湾、浙江、江苏、四川、云南等地。传统上的国兰主要包括春兰（Cymbidium goeringii）、蕙兰（C. faberi）、建兰（C. ensifolium）、墨兰（C.sinense）和寒兰（C. kanran）等5大类。近年来，随着国兰栽培面积的逐渐扩大，病害成为限制生产发展的主要因子，其中枯萎病尤为突出，被称为国兰生产上的头号杀手。国兰枯萎病是由镰刀菌（Fusarium oxysporum）引起的系统性病害，其病原菌能侵染国兰的幼苗和成株，造成假鳞茎坏死，叶片黄化，植株枯死。该病害分布广泛，为害严重。据调查，广东省国兰主要种植基地均有发生，个别花场发病率高达30%。该病害为害广泛，国兰中的春兰、建兰和墨兰等大部分品种都可受害。由于该病害是由镰刀引起的土传病害，生产上防控极为困难。 

    枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）在自然界中分布广泛，不仅存在于土壤、植物根际体表，还是常见的植物内生菌。该菌是一种环境友好型菌，对人畜无害，不污染环境。枯草芽孢杆菌能产生多种抗菌素和酶，具有广谱的抗菌活性和极强的抗逆性。目前，该菌在作物、果树和蔬菜病害上已经显示出很好的防治效果。美国Agraquest公司用枯草芽孢杆菌QST713菌株开发的活菌制剂杀菌剂，可用于防治多种作物的白粉病（Erysiphe spp.，Sphaerotheca spp.）、霜霉病（Plasmopara viticola，Peronosporaspp.）、疫病（Alternaria solani）和灰霉病（Botrytis sp.）等病害。汪澈等研究发现枯草芽孢杆菌B9601-Y2对水稻稻瘟病（Magnaporthe oryzae）、水稻纹枯病（Rhizoctonia solani）和马铃薯晚疫病（Phytophthora infestans）等30多种重要植物病原菌均有很强的抑制作用，并且能促进植物根和地上部分的生长。也有研究表明，枯草芽孢杆菌在水果采后病害的防治上具有很好的发展潜力，可作为拮抗菌用于控制柑桔青霉病（Penicillium digitatum）、油桃褐腐病（Monilinia fructicola）和香蕉冠腐病（Fusarium spp.）等采后病害的发生。可见，枯草芽孢杆菌抗菌谱广，在植物病害防治中是一种理想的生防菌，具有开发生物农药的潜力。 

发明内容

本发明的目的在于针对现有生物防治国兰枯萎病技术的不足，寻找一种具强烈抑菌作用的细菌。 

根据本发明的发明目的，本发明首先提供一种细菌Bacillus subtilis BCF-6，该菌株于2013年09月13日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为CCTCC NO：M 2013420。 

BCF-6菌株是通过常规的组织分离法分离自金嘴兰的假鳞茎。该菌株在PDA培养基上培养48 h后观察，其单菌落为圆形，白色，表面光滑，不透明，隆起，边缘整齐。该菌株经16S rDNA序列分析，其序列与GenBank中Bacillus subtilis（登陆号为JX524224和HQ441254）的同源性达99%；经BIOLOG细菌鉴定系统软件分析表明，BCF-6菌株仅与数据库中的Bacillus subtilis匹配良好，其相似性Similarity（SIM）为0.610。因此于2013年9月13 日在中国典型培养物保藏中心（武汉大学保藏中心，湖北武汉）保藏，保藏号为CCTCC M 2013420。 

根据需求提供一种上述的细菌Bacillus subtilis BCF-6在制备防治国兰枯萎病药物中的应用。 

    更进一步，提供一种上所述的细菌Bacillus subtilis BCF-6制备的生物制剂，该生物制剂是由细菌Bacillus subtilis BCF-6经液体发酵培养制备而得。