[发明专利]去除肝素钠精品中DS杂质的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地说涉及从肝素钠精品中去除DS杂质的方法。 

背景技术

肝素钠是从猪小肠粘膜中提取的一种生化药品，是手术中不可替代的、挽救生命的、市场不能断档的首选药物。自二十世纪四十年代用于临床以来，其应用范围不断扩大，尤其是二十世纪九十年代以来，该产品临床主要用于防止血栓形成，治疗心血管病、血液病、尿毒症等。西方国家已开始研究肝素钠对癌症的防治作用，其新用途不断增加。 

进入二十世纪七十年代以来，我国肝素钠生产工艺不断改进，成为世界肝素钠产量最大的国家。国际市场的肝素钠产品有70％以上来自中国。肝素钠精品生产已由高锰酸钾氧化法发展到双氧水氧化法，结合醇洗分离法，将大量的杂质用乙醇带走，到后来发展到酶解法杂质进一步被去除。随着用药安全标准的不断提高，客户对肝素钠成品DS杂质含量要求也进一步提高，特别是国外客户对肝素钠成品中DS杂质含量要求也更高，为满足市场客户要求，促进出口，国内肝素企业对此工艺技术不断改进最大量的去除DS杂质，从而满足市场需求。 

中国药典及美国药典对肝素钠成品DS杂质含量均无要求，美国客户对我公司提出：DS含量必须≤2％，为满足客户要求，促进出口，故对此立项进行研发。根据肝素钠与硫酸皮肤素(DS)在不同溶剂、不同温度下溶解不同的原理，达到有效分离产品中的硫酸软骨素(DS)杂质的目的。 

发明内容

本发明提供了一种溶解度分离法分离肝素钠与硫酸皮肤素(DS)的方法， 是为了最大限度地去除DS杂质，根据肝素钠与硫酸皮肤素(DS)在不同溶剂、不同温度下溶解不同的原理，在肝素钠精制工序第四次沉淀时，控制有机溶剂的沉淀温度、沉淀度数和沉淀时间，有效去除肝素钠中的DS杂质，从而实现用溶解度分离法将肝素钠与DS杂质分离。 

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案予以实现： 

一种溶解度分离法分离肝素钠中的硫酸皮肤素(DS)的方法，其特征在于：采用溶解度分离法将肝素钠中的硫酸皮肤素(DS)去除。 

在发明的技术方案中，还具有以下技术特征：所述盐解-酶解法包括如下步骤： 

一、提取 

1、粗品溶解： 

开启水阀，加入一定量饮用水，再将肝素钠粗品加入到反应罐中，边搅边加，按原料与饮用水1：(6-7)比例溶解，搅拌5-10小时后，用搅拌棒试底部是否全部溶解； 

2、酶解： 

将上一步溶解液，先用盐酸溶液调PH7.0-8.0，升温至50-55℃之间时加入胃蛋白酶5-10g／亿单位，再加入10-20g／亿单位胰酶，50-55℃保温2-4小时； 

3、急升温： 

将上一步酶解液在30～40分钟内升温至85-90℃，静止10-30分钟，开搅拌，通入循环水降温，待温度降至50-55℃时，用2-6mol／L氢氧化钠溶液调PH10.0-12.0，静止分层20-30小时； 

4、底部沉淀的杂质离心： 

虹吸上清，用40-100目滤袋过滤，过滤后的溶液分为上清液和下层沉淀，留上清液待沉淀，下层沉淀放离心机离心，离心后留上层离心液； 

二、精制 

1、第一次沉淀： 

待上述上清液和离心液温度降至20-30℃，加入20-30g／L氯化钠，搅拌溶 解后，用盐酸将滤液调PH10.0-12.0，边搅边加浓度为95～97％的乙醇溶液，使得乙醇的浓度在20℃时达到45～50％，沉淀10-12小时； 

2、第一次氧化：弃去上层废乙醇，下层沉淀物用纯化水溶解，用氢氧化钠溶液将溶液调PH10.0-12.0，然后加入体积3-5％双氧水，氧化10-12小时； 

3、第二次沉淀：溶液加入20-30g／L氯化钠，搅拌溶解后，用盐酸溶液调将溶液PH6.0-7.0，边搅边加浓度为95～97％的乙醇溶液，使得乙醇的浓度在20℃时达到45～50％，沉淀10-12小时； 

4、第二次氧化：弃去上层废乙醇，下层沉淀物用纯化水溶解，用氢氧化钠溶液将溶液调PH10.0-12.0，然后加入体积3-5％双氧水，氧化10-12小时； 

5、第三次沉淀：溶液加入20-30g／L氯化钠，用盐酸溶液将溶液调PH10.0-12.0，边搅边加浓度为95～97％的乙醇溶液，使得乙醇的浓度在20℃时达到45～50％，沉淀10-12小时； 

6、第三次氧化：弃去上层废乙醇，下层沉淀物用纯化水溶解，用氢氧化钠溶液将溶液调PH10.0-12.0，然后加入体积3-5％双氧水，氧化10-12小时；