[发明专利]一种诊断人类脊髓性肌萎缩症的荧光定量PCR试剂盒

权利要求书

1.一种诊断人类脊髓性肌萎缩症的荧光定量PCR试剂盒，该试剂盒包括扩增引物和荧光探针，其特征在于，所述的扩增引物为，一对特异性扩增SMN1和SMN2基因的共用引物、一对特异性扩增NAIP基因的引物和一对特异性扩增参比序列的引物；所述的荧光探针为，特异性检测SMN1基因的荧光探针、特异性检测SMN2基因的荧光探针、特异性检测NAIP基因的荧光探针和特异性检测参比序列的荧光探针；其中，

（1）所述的一对特异性扩增SMN1和SMN2基因的共用引物中，

上游引物序列为：5’-CATCCATATAAAGCTATCTATATATAG-3’（SEQ NO.1），

下游引物序列为：5’-CTTAATTTAAGGAATGTGAGCACCT-3’（SEQ NO.2）；

（2）所述的一对特异性扩增NAIP基因的引物中，

上游引物序列为：5’-TTGTGACTTATGAGCCGTACAGC-3’（SEQ NO.3），

下游引物序列为：5’-AGGCTACAGCAGAAGCACTGAAT-3’（SEQ NO.4）；

（3）所述的一对特异性扩增参比序列的引物中，

上游引物序列为：5’-GAACACACATGTCAGAAGTCTAAG-3’（SEQ NO.5），

下游引物序列为：5’-ACCTCCAGTTAGATCTTCACTTCT-3’（SEQ NO.6）；

（4）所述的特异性检测SMN1基因的荧光探针为：

5’-TTTGATTTTGTCTGAAACCCTGTAAGG-3’（SEQ NO.7），该探针的荧光素及其淬灭基团为5’-HEX,3’-BHQ1；

（5）所述的特异性检测SMN2基因的荧光探针为：

5’-TTTTGATTTTGTCTAAAACCCTGTAAGGA-3’（SEQ NO.8），该探针的荧光素及其淬灭基团为5’-FAM,3’-BHQ1；

（6）所述的特异性检测NAIP基因的荧光探针为：

5’-ATGGATACCACAGGAGATGGCG-3’（SEQ NO.9），该探针的荧光素及其淬灭基团为5’-CY5,3’-BHQ2；

（7）所述的特异性检测参比序列的荧光探针为：

5’-CAAATGCATCAGATTCCACAAGCT-3’（SEQ NO.10），该探针的荧光素及其淬灭基团为5’-ROX,3’-BHQ2。

（8）所述的参比序列为acctccagtt agatcttcac ttctaaagct aagtgagacc tgagacccat gtagacaccc aagaagcttg tggaatctga tgcatttggc ttagacttct gacatgtgtg ttc（SEQ NO.14），该序列位于NAIP基因端粒侧78kb处的GRCh37/hg19chr5:71107506－71107618区间。

2.根据权利要求1所述的一种诊断人类脊髓性肌萎缩症的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，该试剂盒还包括DNA聚合酶、正常基因型对照gDNA标本、二氯化镁和dNTPs。