[发明专利]一种从芡实加工废液（去涩液）中制备抗菌物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于食品生物学技术领域，具体涉及一种从芡实加工废液（去涩液）中制备抗菌物质的方法。

发明背景

芡实为一年生，水生草本植物，睡莲科。其广泛分布于我国南北各地，南至海南省北至黑龙江都有生长，其中尤以江苏、安徽、山东等省份的产量居多，品质为佳。芡实含有多种营养成分，其传统功效有养血安神、益肾固精、去湿健脾、止泻止滞等。近年的研究表明，芡实还具有除了上述功能以外的一些功效，如改善心脏缺血功能，提高机体抗氧化能力等等。

芡实是一种具有多种营养和保健功能的食品，其传统的食用方法多用于熬粥或制作汤羹食用，亦可碾磨成粉后制成糊状食用，这些传统食法的原料都是芡实的种仁即芡实米。近年来，一种新的芡实食用方法（休闲吃法）在茶吧、棋牌室、饮吧等高档娱乐消费场所悄然流行。用于休闲吃饭的芡实处理方法简单，只需要用去涩机对芡实进行去涩处理后（因为芡实种子的外壳种皮口感很涩），直接用开水或微波炉加热3-4分钟，然后像磕瓜子一样，磕开芡实壳后食用其鲜嫩、润滑的果仁。

随着芡实休闲吃饭的流行，市场对去涩后的芡实需求处于急速上升阶段，江苏扬州、金湖一带，安徽天长一带的芡实企业的主要产品之一就是“去涩后的芡实”。 然而，企业在生产芡实制品的过程中，产生了大量的芡实废液（去涩液），造成了生态环境的污染和资源的浪费。本发明利用天然产物分离、纯化的方法，从这些芡实去涩液中制备了具有明显抑菌活性的物质。该发明不但挖掘了芡实的新的价值，而且提供了一种新的天然抑菌剂的制备方法，因此，我们可以说该发明具有很好的社会效益、经济效益和环保效益，具有潜在的商品化生产的前景。

发明内容

（一）本发明要解决的技术问题：

本发明主要提供一种从从芡实加工废液（去涩液）中制备抗菌物质的方法，其具体包括（1）芡实废液（去涩液）的回收、处理方法；（2）芡实废液（去涩液）中抗菌物质的制备方法的确定。 

（二）本发明的技术方案：

（1）收集9-11月份安徽、江苏等地芡实加工企业的直接排放的芡实加工废液（去涩液）。

（2）芡实去涩液12000 rpm, 离心5分钟，收集离心后的芡实去涩液上清（命名为芡实离心上清1，-20℃保存备用）和芡实去涩液的沉淀（芡实外壳皮及外壳皮细胞）。

（3）称取芡实去涩液的沉淀加入PBS溶液，其中芡实去涩液的沉淀与PBS溶液的比为10：40g/ml，搅拌均匀后，放在-20℃冰冻处理，得到芡实去涩液冰冻物。

（4）芡实去涩液冰冻物弄碎成3-4个大块后，进行间歇式匀浆处理（先匀浆10 秒,停 30 秒,连续 3-6 次,之后再匀浆30秒，停10秒，连续4-8次），以达到匀浆芡实外壳皮组织和冻融芡实外壳皮两重效果。

（5）采用超声波对芡实去涩液的匀浆液中的外壳皮细胞进行破碎15分钟（超声3秒，停3秒），使细胞中的活性物质从细胞中游离出来。

（6）芡实去涩液沉淀物的超声裂解物在12000 rpm条件下，离心10分钟后，收集离心上清（命名为芡实离心上清2）。

（7）合并芡实离心上清液1和芡实离心上清2得到芡实去涩液上清，并测定芡实上清液抑制革兰氏阳性菌（以金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为例）和革兰氏阴性菌（以沙门氏菌和副溶血弧菌为例）繁殖的能力。

其中步骤（3）中在冷冻处理之前在离心后沉淀物中加入PBS溶液，在- 20℃过夜处理12小时左右，其中沉淀物与PBS溶液的用量比例为10：40 g/ml。

（三）本发明其有益效果是：

芡实去涩液是一种芡实生产企业的废弃液，本发明不但研究出从芡实去涩液中制备一种新型抑菌剂的方法，而且该发明还具有诸多有益效果。具体效益如下：

（1）经济效益：使芡实加工废液（去涩液）变废为宝，增加了芡实的附加值，提高了芡实生产企业的经济效益。

（2）环保效益：改变了芡实加工废液直接排放，污染环境的状态，减少了其对生态环境的直接污染，具有明显的环保效益。

（3）社会效益：发明了一种新的天然抗菌剂的生产方法，为下一步开发新型环保抑菌剂奠定了基础。这必将造福百姓，带来较好的社会效益。

附图说明

图1：芡实去涩液上清抑制金黄色葡萄球菌繁殖活性的确定（见实施例1）