[发明专利]红平红球菌几丁质脱乙酰基酶及其构建方法和应用在审

专利信息
申请号: 201310617997.0 申请日: 2013-11-27
公开(公告)号: CN104673774A 公开(公告)日: 2015-06-03
发明(设计)人: 张继泉;孙玉英;相建海 申请(专利权)人: 中国科学院海洋研究所
主分类号: C12N9/80 分类号: C12N9/80;C12N15/55;C12N15/70;C12P19/26;C12R1/01
代理公司: 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 代理人: 周秀梅;李颖
地址: 266071*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 红平红 球菌 几丁质 乙酰 及其 构建 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种红平红球菌几丁质脱乙酰基酶,其特征在于,红平红球菌(Rhodococcus erythropolis HG05)几丁质脱乙酰基酶(chitin deacetylase,CDA)氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示,或者

在SEQ ID NO.2中限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或者几个氨基酸且仍具有几丁质脱乙酰基酶活性的由SEQ ID NO.2衍生出来的蛋白质。

2.权利要求1所述红平红球菌几丁质脱乙酰基酶,其特征在于:所述红平红球菌几丁质脱乙酰基酶编码的基因核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。

3.按权利要求1所述的红平红球菌几丁质脱乙酰基酶的构建方法,其特征在于:

1)构建RhErCDA重组表达载体质粒pCT7-CHISP6H-RhErCDA;

2)将步骤1)所得重组表达载体质粒导入大肠杆菌宿主细胞(BL21(DE3)),进行诱导表达,获得表达产物;

3)以金属螯合层析柱分离纯化步骤2)所得到的重组蛋白,即SEQ ID NO.2中氨基酸所示的重组几丁质脱乙酰基酶;或者

在SEQ ID NO.2中限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或者几个氨基酸且仍具有几丁质脱乙酰基酶活性的由SEQ ID NO.2衍生出来的蛋白质。

4.按权利要求3所述的红平红球菌几丁质脱乙酰基酶的构建方法,其特征在于:

所述步骤3)中以金属螯合层析柱一步法纯化获得电泳纯的SEQ ID NO.2中氨基酸所示的重组RhErCDA。

5.按权利要求1所述的红平红球菌几丁质脱乙酰基酶(RhErCDA)的应用,其特征在于:所述重组RhErCDA可用于制备壳聚糖。

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