[发明专利]一种藻类中提取多糖的提取方法

说明书

技术领域

本发明属海洋生物医药领域，特别涉及一种藻类中提取多糖的提取方法。

背景技术

海藻为海产藻类植物的通称。中药海藻为马尾藻科海蒿子或羊栖菜的干燥藻体,具有软坚散结, 消痰利水的功能。临床用于治疗瘿瘤, 睾丸肿痛, 痰饮水肿等症 。现代研究表明,海藻具有增强免疫能力、抑制病毒和抗肿瘤的活性等作用。这些生物活性与其所含的藻类中提取多糖密切相关。据报道藻类中提取多糖是自然界广泛分布的一种非还原性双糖。其分子结构独特, 化学性质稳定。藻类中提取多糖是一类高效的生物吸附剂, 海澡多糖具有降血脂、抗氧化、免疫调节等作用, 藻类中提取多糖衍生物可作为细胞物质的寒冷保护介质。海藻糖这些奇妙的生物学特性, 使其在医药、食品、化妆品、农业等方面具有广阔的应用前景。藻类中提取多糖的开发已成为国际范围的研究热点。

发明内容

本发明提供一种藻类中提取多糖的提取方法，按照以下步骤进行：

（1）将海藻去杂洗净，干燥后粉碎；

（2）称取100g 海藻粉末, 加85~90% 乙醇回流提取4~6 小时, 过滤, 药渣干燥后, 加水超声提取5 次, 每次10min 过滤, 合并滤液于80~90 ℃浓缩至比重为1.03，醇沉,18~24h  醇沉浓度为75%；离心过滤得沉淀物，沉淀物反复水溶醇沉至无还原糖反应，再经无水乙醇，丙酮洗涤多次后得藻类中提取多糖粗提物；

（3）粗提物经活性碳脱色, Sevage 法脱蛋白, 流水透析法脱小分子, 醇沉, 真空干燥得藻类中提取多糖。

（4），多糖中加入改性淀粉，加入的质量为多糖的0.5-1.2倍，搅拌均匀后，使用微波干燥，得粉末状混合物，在外灭菌15秒后，密封包装。

藻类中提取多糖的含量测定按照以下方法进行：

标准曲线制作: 精密称取葡萄糖标准品12.50mg 溶于100ml 的容量瓶中,得到0.1250mg/ ml 的葡萄糖标准溶液。从标准溶液中, 分别吸取0.0、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0ml, 加水至1ml。再加10% 的苯酚溶液1ml、浓硫酸5ml, 摇匀后放置5min, 置沸水浴放置15min, 取出冷却至室温。在490nm 测其吸光度。得吸光度与浓度的回归方程: A= 53186C+ 010108。( r= 019990) 。

稳定性实验称取: 取已知浓度的多糖溶液0.5ml, 加水至1ml, 迅速加1ml 10% 的苯酚溶液、5ml 浓硫酸, 摇匀后放置5min, 置沸水浴放置15min, 取出冷却至室温。在490nm 测其吸光度。实验中发现其吸光度在0~ 25min 内稳定。

回收率试验: 吸取5 份已知浓度的藻类中提取多糖溶液, 各加标准葡萄糖溶液, 依法测定吸光度, 由回归方程计算回收率。经计算，其回收率为95%以上，藻类中提取多糖含量提取率为4.26~4.36%。

本发明从海藻中提取藻类中提取多糖, 并可根据其具有较强的生物吸附能力、降血脂、抗氧化、增强免疫调节活性等, 将其开发成功能食品及药品, 或制备微胶囊。藻类中提取多糖将可能成为人类主要的药物资源。藻类中提取多糖的含量测定采用传统的苯酚- 硫酸法, 方法简便, 回收率高, 重现性好, 数据可信。

本发明一种藻类中提取多糖的提取方法，方法简便快速, 重现性好, 回收率高。

具体实施方式

     本发明所用海藻为浙江象山产，所用化学试剂为市购。

实施例1

一种藻类中提取多糖的提取方法，按照以下步骤进行：

（1）将海藻去杂洗净，干燥后粉碎；

（2）称取100g 海藻粉末, 加90% 乙醇回流提取4 小时, 过滤, 药渣干燥后, 加水超声提取5 次, 每次10min 过滤, 合并滤液于80~90 ℃浓缩至比重为1.03，醇, 24h  醇沉浓度为75%；离心过滤得沉淀物，沉淀物反复水溶醇沉至无还原糖反应，再经无水乙醇，丙酮洗涤多次后得藻类中提取多糖粗提物；

（3）粗提物经活性碳脱色, Sevage 法脱蛋白, 流水透析法脱小分子, 醇沉, 真空干燥得藻类中提取多糖4.36g.

（4），多糖中加入改性淀粉，加入的质量为多糖的0.5-1.2倍，搅拌均匀后，使用微波干燥，得粉末状混合物，在外灭菌15秒后，密封包装。

实施例2

一种藻类中提取多糖的提取方法，按照以下步骤进行：