[发明专利]硫酸软骨素的稀碱-酶解提取工艺无效
申请号: | 201310632539.4 | 申请日: | 2013-11-26 |
公开(公告)号: | CN103804519A | 公开(公告)日: | 2014-05-21 |
发明(设计)人: | 刘乃山;刘汝荣;迟培升;夏衬来 | 申请(专利权)人: | 青岛九龙生物医药有限公司 |
主分类号: | C08B37/08 | 分类号: | C08B37/08 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 硫酸 软骨素 提取 工艺 | ||
1.一种提取硫酸软骨素的方法。其特征在于具体包括如下步骤:
(1)提取:
取洁净干燥猪鼻软骨,加水浸泡过夜;然后用9%-12%NaOH,室温下搅拌提取4小时,待浸出液浓度达5波美度(20℃)时,过滤,滤渣再以2倍量2%NaOH提取24小时,过滤,合并滤液。
(2)酶解:
提取液用HCl调pH8.8-8.9,升温至50℃加入相当于1:25倍的胰酶,于53-54℃保温水解6至7小时。在水解过程中,由于氨基酸的增加,pH下降,需用10%的NaOH调整pH8.8-9.0。水解终点检查:取水解液10毫升加10%三氯乙酸1至2滴,若微显浑浊,说明酶解效果良好,否则酌情增加胰酶。
(3)升温:
用1:1盐酸调pH至6.8-7.0。升温80℃至90℃,静止10min,再用盐酸调pH6.4,静置过滤,得清液。
(4)沉淀干燥:
用10%NaOH调节pH6.0,加入清液体积1%量的氯化钠,溶解,过滤至澄清。加入95%乙醇浓度达75%,每30分钟搅拌一次,使细粒聚集成大颗粒沉淀,静置8小时以上,吸去上清液,沉淀用无水乙醇脱水洗涤,抽干,于60-65℃真空干燥。即得成品硫酸软骨素。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征为:旋光为:左旋大于25度,蛋白含量小于2.5%,pH6.0-7.5,420mn,吸光度为:0.35。
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