[发明专利]人树突状细胞疫苗制备的专用试剂盒有效
申请号: | 201310638797.3 | 申请日: | 2013-12-04 |
公开(公告)号: | CN103638517A | 公开(公告)日: | 2014-03-19 |
发明(设计)人: | 马飞;黄浩;申珊珊 | 申请(专利权)人: | 深圳市合一康生物科技有限公司 |
主分类号: | A61K39/00 | 分类号: | A61K39/00;A61P35/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 518057 广东省深圳市南山区高新区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 树突 细胞 疫苗 制备 专用 试剂盒 | ||
1.一种人树突状细胞疫苗制备的专用试剂盒,其特征在于包括:
(1)单核细胞分离获取培养基;
(2)促DC诱导分化培养基;
(3)促DC成熟剂;
(4)肿瘤抗原。
2.根据权利要求1所述人树突状细胞疫苗制备的专用试剂盒,其特征在于,所述单核细胞分离获取培养基为PAATM培养基、GT-T551TM培养基、Opti-MEMTM培养基、RPMI-1640培养基中的任意一种。
3.根据权利要求1或2所述人树突状细胞疫苗制备的专用试剂盒,其特征在于,所述促DC诱导分化培养基的溶剂为X-VIVO-15TM培养基或者AIM-VTM培养基中任意一种,溶质为GM-CSF和IL-4,其中GM-CSF的浓度是800-1000IU/ml,IL-4的浓度是800-1000IU/ml。
4.根据权利要求3所述人树突状细胞疫苗制备的专用试剂盒,其特征在于,所述促DC成熟剂的溶剂为X-VIVO-15TM培养基或者AIM-VTM培养基中任意一种,溶质为IL-1β、IL-6、TNF-α,或者IL-1β、IL-6、TNF-α与IFN-γ、Mtb-Hag中的一种或者两种,该促DC成熟剂加入到培养体系后,IL-1β终浓度为8-15ng/mL,IL-6终浓度为50-150ng/mL,TNF-α终浓度为8-15ng/mL,Mtb-Hag终浓度为5~10μg/ml,IFN-γ终浓度为100~1000IU/m1。
5.根据权利要求1或2或4所述人树突状细胞疫苗制备的专用试剂盒,其特征在于,所述肿瘤抗原为下述抗原中的一种或多种:CD19、CD20、WT-1、MUC1、LMP2、HPVE6E7、EGFRvIII、HER-2/neu、Idiotype、MAGE A3、p53、NY-ESO-1、PSMA、GD2、CEA、MelanA/MART1、Ras mutant、gp100、p53mutant、Proteinase3、bcr-abl、Tyrosinase、Survivin、PSA、hTERT、Sarcoma、EphA2、PAP、ML-IAP、AFP、EpCAM、ERG、NA17、PAX3、ALK、Androgen receptor、Cyclin B1、Polysialic acid、MYCN、RhoC、TRP-2、GD3、Fucosyl GM1、Mesothelin、PSCA、MAGE A1、sLe(animal)、CYP1B1、PLAC1、GM3、BORIS、Tn,该抗原加入培养体系后浓度是1~20μg/ml。
6.根据权利要求3所述人树突状细胞疫苗制备的专用试剂盒,其特征在于,所述肿瘤抗原为下述抗原中的一种或多种:CD19、CD20、WT-1、MUC1、LMP2、HPV E6E7、EGFRvIII、HER-2/neu、Idiotype、MAGE A3、p53、NY-ESO-1、PSMA、GD2、CEA、MelanA/MART1、Ras mutant、gp100、p53mutant、Proteinase3、bcr-abl、Tyrosinase、Survivin、PSA、hTERT、Sarcoma、EphA2、PAP、ML-IAP、AFP、EpCAM、ERG、NA17、PAX3、ALK、Androgen receptor、Cyclin B1、Polysialic acid、MYCN、RhoC、TRP-2、GD3、Fucosyl GM1、Mesothelin、PSCA、MAGEA1、sLe(animal)、CYP1B1、PLAC1、GM3、BORIS、Tn,该抗原加入培养体系后浓度是1~20μg/ml。
7.根据权利要求1或2所述人树突状细胞疫苗制备的专用试剂盒,其特征在于,所述单核细胞分离获取培养基、促DC诱导分化培养基、促DC诱导成熟培养基的PH是7.2~7.4。
8.根据权利要求1-7任一项所述专用试剂盒培养人树突状细胞疫苗的方法,其特征在于:所述专用试剂盒需要与10%的自体血浆配合使用,能高表达CD80、CD86、HLA-DR,低表达CD83,同时能够分泌大量的IL-12的人树突状细胞疫苗。
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