[发明专利]一种制备尿激酶粗品的方法有效
申请号: | 201310643507.4 | 申请日: | 2013-11-30 |
公开(公告)号: | CN103740687A | 公开(公告)日: | 2014-04-23 |
发明(设计)人: | 刘乃山;张晓涵;安迪;张元泽 | 申请(专利权)人: | 青岛康原药业有限公司 |
主分类号: | C12N9/72 | 分类号: | C12N9/72 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266300 山东省青*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 制备 尿激酶 方法 | ||
1.一种制备尿激酶粗品的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
(1)吸附工序:取合格尿液用二层纱布过滤,滤入搅拌罐中;不断搅拌的同时,缓慢加入离子交换树脂,调节pH,搅拌吸附,洗涤树脂至澄清;
(2)脱附工序:搅拌洗脱,抽滤,收集洗脱液,再次洗脱,收集洗脱液,合并两次洗脱液;
(3)盐析工序:加入固体硫酸铵,搅拌溶解,调节pH值,加丙酮,搅拌,放置沉淀,离心,得尿激酶盐析品,即尿激酶粗品。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,调节尿液的pH值到4.5~6.5;搅拌吸附的时间为:1~2小时;洗涤树脂时先用水洗涤去残尿及杂质,然后用磷酸缓冲液洗至澄清。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,所用的洗脱液为含氯化钠的氨水;第一次搅拌洗脱时间为0.5~1.5小时;第二次搅拌洗脱时间为20~50分钟。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,按照洗脱液的体积加入固体硫酸铵,搅拌溶解,使溶液达到50%~70%的饱和度;在-4~0℃用醋酸调节溶液上清液pH值至4.5~6.5;用丙酮沉淀,沉淀时间为12~16小时;每1000ml溶液中加入固体硫酸铵的重量为300~450g。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所得的尿激酶粗品应在阴凉处保存。
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