[发明专利]一种流速可控的层析柱有效
申请号: | 201310643988.9 | 申请日: | 2013-12-05 |
公开(公告)号: | CN103691152A | 公开(公告)日: | 2014-04-02 |
发明(设计)人: | 朱辉;王元桦 | 申请(专利权)人: | 成都雅途生物技术有限公司 |
主分类号: | B01D15/22 | 分类号: | B01D15/22;C07K1/16 |
代理公司: | 成都华典专利事务所(普通合伙) 51223 | 代理人: | 徐丰;杨保刚 |
地址: | 610000 四川省成都市高新*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 流速 可控 层析 | ||
技术领域
本发明属于生物纯化器械,具体涉及一种流速可控的层析柱。
背景技术
目前,多种化合物的组合物、天然产物及中药的分离纯化,主要是采用柱色谱,使用层析柱,通过柱层析过程来实现。传统的柱色谱是将混合化合物放置在玻璃柱柱床的顶端,使混合溶剂组成的洗脱剂( 流动相) 在重力作用下,通过装有吸附性介质材料( 固定相) 的垂直玻璃柱,分离得到各个较纯的产品( 纯品),其原理是:由于混合化合物中各组分对色谱柱中固定相和流动相的亲和力不同,故根据混合化合物的性质选择合适的固定相和流动相,可以达到将其中各组分尽可能分离的目的,分离的产品在柱子出口分别被收集到各个收集瓶中,然后,鉴定各个收集瓶中的收集到的层析液,根据鉴定结果合并和浓缩各相同层析液,得到各个纯品。
目前的层析柱存在以下问题:1. 在进行层析操作时不能控制液体的流速,如果样品液的流速过快,很容易造成目的蛋白与柱体内填料接触时间过短而不宜被吸附,如果洗脱液的流速过快,也不容易将目的蛋白交换洗涤下来;如果流速过慢,又会增加层析时间,由于流速的没有被量化,在下次处理同样或者相似的蛋白时,无法提供参考;2. 在进样时,样品溶液从层析柱顶端的中部直接流进柱体,容易造成柱体内填料飞溅至层析柱的内壁上。由于层析用的填料常常是比较昂贵的,飞溅至内壁上的填料没有在层析中得到充分的利用,影响层析效果。
发明内容
为解决上述问题,本发明提供一种可拆分的层析柱,采用如下技术方案:
一种流速可控的层析柱,包括柱头和柱体,所述柱头与柱体为螺纹连接,其特征在于,所述柱头的顶部设有供硅胶软管通过的通孔;所述柱体的顶部设置可拆卸的U型筛网,所述U型筛网为上端开口、下端封闭的喇叭形状,所述U型筛网的侧壁含有通孔;所述U型筛网的上部放置中速定性滤纸滤膜,所述滤膜的表面积大于或者等于U型筛网的表面积;所述柱体的底部为锥形出口;所述锥形出口的上部设置筛板,所述的筛板的孔径为0.2~0.4μm;所述锥形出口的下部设置流速控制器。
优选地,所述柱头和柱体的连接处设有密封圈,所述的密封圈为硅胶材质。
本发明具有如下有益效果:
1. 本发明提供的层析柱,在柱体的顶部设置可拆卸的U型筛网,所述U型筛网为为上端开口、下端封闭的喇叭形状,并且U型筛网的侧壁含有通孔,如此设置,有利于缓冲液、样品液、洗脱液从柱体顶部进入时,是沿着柱体的四壁流下的,不会造成柱体内液体的飞溅,引起填料飞溅在柱体的四壁上,影响填料高度,从而影响蛋白的纯化效果。
2. 本发明提供的层析柱,在柱体的底部设置柱尾,并且在柱尾的内部、出液口的上部设置筛板,并限定筛板的孔径为0.2~0.4μm,并在筛板上设置醋酸纤维膜作为优选方式,如此这样便可以达到蛋白纯化时的填料不会随着缓冲液、样品液、洗脱液一起,从锥形出口流失,但又不会影响缓冲液、样品液和洗脱液从锥形出口的流出效果;此外,将筛板设置在柱尾上,当纯化完成后,可以打开柱尾,很方便地取出柱体内的填料。
3. 本发明提供的层析柱,U型筛网的上部放置中速定性滤纸滤膜,可以对待分离的样品液进行初步分离,拦截粒径比较大的未处理完全的菌体等杂质,还可以避免层析样品堵塞U型筛网。
4. 本发明提供的层析柱,在柱头和柱体的连接处设有密封圈,便于柱头和柱体的密闭,避免缓冲液、样品液、洗脱液从两者的缝隙处流出,造成浪费。
5. 本发明提供的层析柱,在出液口的下部设置流速控制器,可通过流速控制器对流速进行控制,且能够直接读出流速,方便实验操作,对层析操作中的流速进行量化,有利于对以后进行相同或者相似蛋白的纯化操作提供参考作用。
6. 本发明提供的层析柱,结构简单,操作方便,蛋白的纯化效果好。
附图说明
图1为本发明的结构示意图;其中,1表示柱头;2表示硅胶软管;3表示锥形出口;4表示流速控制器;5表示筛板;6表示U型筛网;7表示柱体。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。除下述实施方式外,本发明还可以有其他实施方式,凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案,均落在本发明要求的保护范围内。
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