[发明专利]用于植入前因子的新型检测方法以及植入前因子肽

说明书

本申请是针对2002年6月28日递交的申请号为201210307132.X、发明名称为“用于植入前因子的新型检测方法以及植入前因子肽”的分案申请。

上述分案申请是针对2002年6月28日递交的申请号为201110025233.3、发明名称为“用于植入前因子的新型检测方法以及植入前因子肽”的分案申请。

上述分案申请是针对2002年6月28日递交的申请号为200710086405.1、发明名称为“用于植入前因子的新型检测方法以及植入前因子肽”的分案申请。

上述分案申请是针对2002年6月28日递交的申请号为02813319.6、发明名称为“用于植入前因子的新型检测方法以及植入前因子肽”的分案申请。

1.技术领域

本发明涉及植入前因子(preimplantation factor，以下简称为PIF)，它是受孕和胚胎可存活性(embryo viability)的早期标志物。本发明还涉及检测PIF活性的新方法，以及PIF肽。

2.背景技术

不育是困扰世界上数百万对夫妇的重要健康问题。人类孕体的早期死亡是一个常见现象，而这也是造成不育的一方面因素。在自然的单个胎儿(single conceptions)中，约有73％都在妊娠的第6周之前死亡(Boklage CE.，从受孕至足月生产之间人类胎儿的存活概率.国际生育学杂志(Int J Fertil)1990；35：75)。这主要是由于在植入之前或植入后的很短时间内所发生的早期胚胎死亡。大龄妇女的生育率较低，而由年轻妇女捐献卵母细胞后生育率提高，与上述现象相关的数据表明：对于获得成功的妊娠而言，卵母细胞的质量很重要(Navot D，Bergh PA，Williams MA等，较差的卵母细胞质量而不是植入失败引起了与年龄相关的雌性生育力的下降，柳叶刀(Lancet)1991；337：1375)。

体外受精(in vitro fertilization，以下简称为“IVF”)技术已经被发展起来，用于解决不育的问题。但是，在体外培养用于植入的胚胎时的人工条件下，维持胚胎的可存活性甚至更困难一些。在体外，胚胎的生长速度要比在体内时慢，通常只有25-65％的胚胎能够发育到囊胚阶段(在Gomel V，Leung PCK，编的“体外受精和辅助生殖”(In vitro fertilization and assisted reproduction)第10届世界大会(Procc 10th World Congress)，1997：1中的Gardner DK，Lane M，KOuridakis K，Schoolvcraft WB.，基于生理学复合体的无血清培养基增强哺乳动物胚胎发育(Complex physiologically based serum-free culture media increase mammalian embryo development))现有技术尚不能鉴别出那些可能植入和存活的胚胎。人绒毛膜促性腺激素(hCG)是目前正在使用的用于体内受精和早期胚胎植入的标志物，但是，它只有在植入后的几天才能被检测到。由于缺乏胚胎可存活性的适当标志物，因此，目前很多不能植入的胚胎都被转移了，从而降低了获得成功妊娠的机会。

为了解决胚胎可能无法存活的问题，更多数量的胚胎被同时转移到了未来母亲的体内。大量胚胎的转移可能导致多次怀孕(multiple pregnancies)，这是固有的危险，但如果只转移少量胚胎，又可能有没有一个胚胎能植入的风险，从而失去一整个IVF周期。很明显，需要改进对胚胎的选择，并定义准确的标志物以确定胚胎的可存活性。此外，使用非侵入性方法，通过在培养基中检测对可存活的、能植入的胚胎特异的产物，将使得人们可以选择出那些最有可能产生成功妊娠的胚胎，而不会对胚胎产生伤害。

决定妊娠成功与否的另一个因素是孕体与母体免疫系统之间的相互作用。在受精后的很短时间内，应该发生妊娠的系统母体识别(a systemic maternal recognition of pregnancy)。由特异性早期胚胎信号所激发的母体免疫系统调节，可能是该过程中的关键。一旦卵母细胞被受精，合子直到孵化中的囊胚(hatching blastocyst)都被透明带(the zone pellucida)所包围，透明带是坚硬的半透明的膜。因此，当胚胎还在输卵管和子宫腔内发育时，胚胎-母体之间的交流(communication)就已经通过胚胎所分泌的化合物而同时发生了。