[发明专利]乙型肝炎e抗体测定试剂盒以及检测方法

权利要求书

1.一种乙型肝炎e抗体测定试剂盒，其特征在于，包括试剂R、试剂N、试剂M以及对照品，所述试剂R中的组分包括生物素化抗-HBe抗体、吖啶酯标记的抗-HBe抗体、MES缓冲液以及诊断试剂防腐剂；所述试剂N中的组分包括基因重组HBeAg、MES缓冲液以及诊断试剂防腐剂；所述试剂M中组分包括亲和素包被磁微粒，所述磁微粒经诊断试剂防腐剂处理；所述对照组包括人源性乙肝e抗体、新生牛血清以及诊断试剂防腐剂；所述吖啶酯标记的抗-HBe抗体是以吖啶酯通过偶联剂偶联抗-HBe抗体，所述偶联剂为二甲基亚胺或戊二醛；所述试剂盒还包括以H₂O₂-NaHO₃为基础的底物液系统，所述底物液系统中含有作为为发光增强剂的曲通100。

2.根据权利要求1所述的乙型肝炎e抗体测定试剂盒，其特征在于，所述亲和素包被磁微粒中的亲和素为链霉亲和素、中性亲和素或类亲和素，所述亲和素包被磁微粒中的磁微粒是以四氧化三铁为内核表面包裹活性基团的聚合物。

3.根据权利要求1所述的乙型肝炎e抗体测定试剂盒，其特征在于，所述抗-HBe抗体为鼠源单克隆抗-HBe抗体。

4.根据权利要求1所述的乙型肝炎e抗体测定试剂盒，其特征在于，试剂R和试剂N中所述MES缓冲液的浓度均为0.05M，pH值为6.0。

5.根据权利要求1所述的乙型肝炎e抗体测定试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂防腐剂为0.1%的Proclin300防腐剂。

6.根据权利要求1所述的乙型肝炎e抗体测定试剂盒，其特征在于，所述试剂R和试剂N的量为12ml，所述试剂M的量为3 ml。

7.根据权利要求1所述的乙型肝炎e抗体测定试剂盒，其特征在于，所述对照品包括对照品1和对照品2两组，所述对照品1的量为0.5ml，浓度为0.0 PEI U/ml，所述对照品2的量为0.5ml，浓度为2.0 PEI U/ml。

8.一种使用权利要求1-7所述的乙型肝炎e抗体测定试剂盒的检测方法，其特征在于，包括以下几步：

（1）在将待测样品和含有基因重组的HBeAg的试剂N混合进行反应，将形成抗体-抗原复合体的反应液1；

（2）在反应液1中加入含有生物素化的e抗体（Anti-HBe）及吖啶酯标记的Anti-HBe的试剂R进行反应，形成生物素化抗体-HBeAg-吖啶酯标记抗体复合体的数量减少的反应液2；

（3）在反应液2中加入含有亲和素包被磁微粒的试剂M，反应液2中的复合体在生物素和亲和素的相互作用下形成固相；

（4）将反应液置于化学发光测定仪上进行检测，在磁场的检测中的磁微粒将被吸附，通过洗涤液洗涤，将未结合物冲洗除去；然后，注入化学发光激发液1及化学发光激发液2，检测其化学发光光子强度；产生的光强度与样本内Anti-HBe浓度成反比。

9.根据权利要求8所述的乙型肝炎e抗体测定试剂盒的检测方法，其特征在于，所述化学发光激发液1中含有过氧化氢，所述化学发光激发液2中含有氢氧化钠，所述洗涤液含有磷酸盐缓冲液。