[发明专利]一种醇沉竹节参多糖及其制备方法与它的用途有效
申请号: | 201310654756.3 | 申请日: | 2013-12-05 |
公开(公告)号: | CN103613680A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | 袁丁;张长城;刘朝奇;王婷;孙志伟;周志勇;崔倩倩;万静枝;何毓敏 | 申请(专利权)人: | 三峡大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61K31/715;A61K39/39;A61P37/04 |
代理公司: | 北京君智知识产权代理事务所 11305 | 代理人: | 向华 |
地址: | 443002 *** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 竹节参 多糖 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种用作疫苗佐剂的醇沉竹节参多糖的制备方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
A、竹节参水提取
将竹节参原料粉碎,按照竹节参与乙醇水溶液的重量比1:5~15,将粉碎竹节参浸泡在体积分数为85~95%乙醇水溶液中,浸泡1~5h,再加热回流提取脱脂,分离得到提取液与竹节参渣,提取液弃去,按照竹节参渣与蒸馏水的重量比1:5~15,往所述竹节参渣中添加蒸馏水,加热回流提取1~5h,然后分离,提余的竹节参渣再用蒸馏水重复提取2~5次,蒸馏水提取液合并,再减压浓缩,除去其水量的4/5~14/15的水分,得到浓缩的水提取液;
B、脱蛋白
按照步骤A得到的浓缩水提取液与Sevage试剂按重量比1:0.3~1.5,往所述浓缩水提取液中加入Sevage试剂,震摇后静置,上层液进行离心分离,离心的上清液按照上述操作重复2~10次,得到脱蛋白的上清液;
C、氧化
往步骤B得到的脱蛋白上清液中加入氨水,将所述上清液的pH值调节至7.0~9.0,再向其中缓慢滴加H2O2,在不断的搅拌下使H2O2的体积达到所述脱蛋白上清液体积的1~5%,然后在温度30~60℃下保温2~8h,得到一种无色溶液;
D、醇沉
往步骤C得到的无色溶液中加入体积分数为95%乙醇,使无色溶液中的乙醇浓度达到体积分数为30~90%,然后在室温下静置3~15h,再进行离心,离心上清液进行真空干燥,得到醇沉竹节参多糖。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于在步骤A中,所述竹节参渣与蒸馏水按照重量比1:8~12混合,然后加热回流提取2~4h。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于在步骤A中,所述的减压浓缩是在压力0.001~0.01MPa下进行浓缩。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于在步骤B中,所述浓缩水提取液与Sevage试剂的重量比是0.6~1.2。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于在步骤C中,含有H2O2的脱蛋白上清液在温度38~50℃下保温3.2~6.5h。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于在步骤C中,含有乙醇的无色溶液在室温下静置5~12h。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于在步骤D中,所述真空干燥是在压力0.01~0.1MPa与温度30~50℃的条件下进行干燥。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述的离心分离是在离心机转速1000~3000转/分的条件下进行分离的。
9.根据权利要求1-8所述制备方法得到的醇沉竹节参多糖。
10.根据权利要求9所述的醇沉竹节参多糖在制备疫苗佐剂中的用途。
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