[发明专利]检测大肠杆菌的DNA电化学生物传感器及其制备方法在审
| 申请号： | 201310656003.6 | 申请日： | 2013-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN104698043A | 公开（公告）日： | 2015-06-10 |
| 发明（设计）人： | 郑军;赵朝辉;谢国明;罗鹏 | 申请（专利权）人： | 重庆医科大学 |
| 主分类号： | G01N27/26 | 分类号： | G01N27/26;G01N27/327 |
| 代理公司： | 无 | 代理人： | 无 |
| 地址： | 400016*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 大肠杆菌 dna 电化学 生物 传感器 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测大肠杆菌的DNA电化学生物传感器及其制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)电极表面11-巯基十一烷酸-BPA单分子自组装层的制备；
(2)电极表面HRP-Avidin功能化的DNA检测探针和生物素化的DNA捕获探针及检测体系的制备；
(3)检测大肠杆菌工作曲线的绘制。
2.根据权利要求1所述的电极表面11-巯基十一烷酸-BPA单分子自组装层的制备，其特征在于：在打磨处理后的电极表面加入EDC和NHS混合液后在室温下孵育，用PBS缓冲液清洗，并在氮气中烘干后加入BPA。
3.根据权利要求1所述的电极表面HRP-Avidin功能化的DNA检测探针和生物素化的DNA捕获探针及检测体系的制备，其特征在于：
(1)在电极表面加入生物素化DNA捕获探针，孵育后取出用PBS轻轻冲洗，再加入食物标本中分离的大肠杆菌16S rDNA靶序列待检液；
(2)在电极表面再加入HRP-Avidin功能化的大肠杆菌DNA检测探针序列，然后将修饰后的电极入水浴箱中充分孵育杂交后取出，用PBS缓冲液冲洗，加入TMB-H2O2。
4.根据权利要求1所述的检测大肠杆菌工作曲线的绘制，其特征在于：通过差分脉冲电流图统计数据，根据所检测不同浓度的大肠杆菌16S rDNA绘制工作曲线。
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