[发明专利]一种获得植物高花青素含量毛状根的方法有效
| 申请号： | 201310656046.4 | 申请日： | 2013-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN103695460A | 公开（公告）日： | 2014-04-02 |
| 发明（设计）人： | 刘宝龙;张怀刚;刘登才;张波;陈文杰;沈裕虎;魏乐 | 申请（专利权）人： | 中国科学院西北高原生物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/06 |
| 代理公司： | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人： | 董芙蓉 |
| 地址： | 810008 青*** | 国省代码： | 青海;63 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 获得 植物 花青素 含量 毛状根 方法 | ||
1.一种获得植物高花青素含量毛状根的方法，其特征在于：它获得的步骤如下：
(一)、设计包含AttB1adapter和AttB2adapter的引物，将植物中调控花青素合成代谢的MYB基因AmROS1和bHLH基因AmDEL通过Gateway克隆的BP反应连接到载体pDONR207；然后利用Gateway克隆的LR反应将AmROS1和AmDEL分别连接到载体PJAM1502(卡那霉素抗性)和载体pK7WG2D(壮观霉素抗性)中获得PJAM1502：：AmROS1和pK7WG2D：：AmDEL；
(二)、利用电转化的方法将PJAM1502：：AmROS1和pK7WG2D：：AmDEL转化到发根农杆菌Ar1193中，通过利福平、卡那霉素和壮观霉素抗生素筛选，获得包含PJAM1502：：AmROS1和pK7WG2D：：AmDEL的发根农杆菌；
(三)、烟草在无菌培养基上发芽生长19天，在超净台中将烟草叶片剪成小方块，侵染20分钟，共培养2天后，在MS固体培养基(250mg/L塞福隆，50mg/L卡那霉素)培养20天后，在烟草的伤口处出现紫色毛状根；
(四)、将毛状根放入三角瓶后，加入MS液体培养基(250mg/L塞福隆，50mg/L卡那霉素)，震荡培养28天后，测定毛状根中花青素含量为132mg/100g，接近水果蓝莓中的花青素含量；
(五)、质谱鉴定毛状根中含有3种花青素类化合物，与烟草花中花青素种类与结构相同。
2.根据权利要求1所述的一种获得植物高花青素含量毛状根的方法，其特征在于：将调控花青素合成代谢的MYB基因和bHLH基因转化到同一个发根农杆菌中，侵染植物的组织器官，获得高花青素含量的毛状根。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院西北高原生物研究所，未经中国科学院西北高原生物研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310656046.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
