[发明专利]一组糖基转移酶及其应用

权利要求书

1.一种体外糖基化方法，其特征在于，包括步骤：

在糖基转移酶存在下，将糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的以下位点上：

C-20位、C-6位；

从而形成糖基化的四环三萜类化合物；

其中，所述的糖基转移酶选自：

如SEQ ID NOs.:2、16、18或20所示的糖基转移酶。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述糖基转移酶用于催化下述一种或多种反应或被用于制备催化下述一种或多种反应的催化制剂：

(A)

其中，R1为H，单糖糖基或多糖糖基；R2和R3为H或OH；R4为糖基；所述的糖基转移酶选自SEQ ID NOs：2、16或18；

(B)

其中，R1为H或者糖基，R2为糖基，R3为糖基，所述的糖基转移酶选自SEQ ID NOs.:2、16、18或20；

或，R1为H或者糖基；R2为H或者糖基；R3为糖基，所述的糖基转移酶选自SEQ ID NO.:20。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述糖基转移酶催化的反应

底物为式(I)或(III)化合物，且产物为(II)或(IV)化合物。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的式(I)化合物为原人参二醇PPD，并且式(II)化合物为人参皂苷CK；

或，所述的式(I)化合物为人参皂苷Rh2，并且式(II)化合物为人参皂苷F2；

或，所述的式(I)化合物为人参皂苷Rg3，并且式(II)化合物为人参皂苷Rd；

或，所述的式(I)化合物为原人参三醇PPT，并且式(II)化合物为人参皂苷F1；

或，所述的式(I)化合物为达玛烯二醇DM，并且式(II)化合物为人参皂苷20-O-β-(D-吡喃葡萄糖基)-达玛烯二醇；

或，所述的式(III)化合物为原人参三醇PPT，并且式(IV)化合物为人参皂苷Rh1；

或，所述的式(III)化合物为人参皂苷F1，并且式(IV)化合物为人参皂苷Rg1。

5.一种分离的多肽，其特征在于，所述的多肽选自下组：

(a)如SEQ ID NO.:20所示氨基酸序列的多肽；(b)将SEQ ID NO.:20所示氨基酸序列的多肽添加信号肽序列后形成的、并具有糖基转移酶活性的多肽。

6.如权利要求5所述的多肽，其特征在于，所述的多肽还为选自下组的一种或多种额外多肽：

如SEQ ID NOs.:2、16或18所示氨基酸序列的多肽。

7.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸选自下组：

(A)编码权利要求5所述多肽的核苷酸序列；

(B)编码如SEQ ID NO.:20所示多肽的核苷酸序列；

(C)如SEQ ID NO.:19所示的核苷酸序列；

(F)与(A)-(C)任一所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。

8.如权利要求7所述的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸还为选自下组的多核苷酸：

(A)编码权利要求6所述多肽的核苷酸序列；

(B)编码如SEQ ID NOs.:2、16或18所示多肽的核苷酸序列；

(C)如SEQ ID NOs.:1、15或17所示的核苷酸序列。

9.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求7或8所述的多核苷酸。

10.权利要求5所述分离的多肽的用途，其特征在于，它被用于催化以下反应，或被用于制备催化以下反应的催化制剂：

(ii)将来自糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的C-6位的羟基。

11.权利要求6所述分离的多肽的用途，其特征在于，它被用于催化以下反应，或被用于制备催化以下反应的催化制剂：

(ii)将来自糖基供体的糖基转移到四环三萜类化合物的C-20位的羟基。